基于动物实验和转录组学探究加味七方胃痛颗粒阻断大鼠胃“炎癌转化”的作用机制

摘要

本研究旨在探讨加味七方胃痛颗粒阻断胃癌前病变(precancerous lesions gastric cancer, PLGC)“炎癌转化”的分子机制，明确其对胃癌前病变的调控作用。本研究通过复合造模法构建PLGC大鼠(Rattus norregicus)模型，随机分为对照组、模型组、维酶素组及中药组。采用HE染色法评估胃黏膜病理学改变，采用免疫组织化学技术检测p53、 Ki-67蛋白表达；通过转录组测序筛选差异表达基因(differentially expressed genes, DEGs),对DEGs进行功能注释和KEGG富集分析，并对富集到的关键信号通路进行验证。研究结果显示，与空白组大鼠相比，模型组大鼠体质量和3 h进食量均显著降低(P<0.01),胃黏膜腺体萎缩明显，Ki-67、 p53蛋白表达水平升高(P<0.01);与模型组相比，中药组和维酶素组的体质量和3 h进食量显著增加(P<0.01),胃黏膜腺体萎缩改善，炎性细胞浸润数量减少，Ki-67、 p53蛋白表达水平降低(P<0.01)。转录组学测序显示，和模型组相比，空白组中发现了1 197个DEGs;和模型组相比，中药组中有1 298个DEGs。对两组DEGs进行多基因富集可视化，发现PI3K-Akt信号通路显著富集。Western blot结果显示，与正常组大鼠胃组织相比，模型组大鼠胃组织p-PI3K、 p-Akt相对表达水平显著升高(P<0.05);与模型组相比，维酶素组及中药组大鼠胃组织的p-PI3K、 p-Akt相对表达水平显著降低(P<0.05)。本研究发现加味七方胃痛颗粒能有效改善PLGC模型大鼠一般情况及胃黏膜病理状态，降低大鼠血清中的炎症因子IL-6和TNF-α的水平，以及胃组织中“炎癌转化”相关蛋白p53和Ki-67的表达水平，阻断大鼠胃“炎癌转化”的进程，其具体机制可能与调控PI3K-Akt信号通路有关。

关键词

加味七方胃痛颗粒 / 转录组学 / 胃癌前病变 / 胃癌 / 炎癌转化