Huh7细胞来源外囊泡协同新城疫病毒通过激活自噬与抑制JAK2/STAT3通路抑制肝癌Huh7细胞恶性生物学行为

摘要

本研究主要探讨Huh7细胞来源外囊泡(Huh7 cell-derived extracellular vesicles, Huh7-EVs)联合新城疫病毒(Newcastle disease virus, NDV)对肝癌Huh7细胞生物学行为的协同抑制作用及潜在机制。通过饥饿预处理诱导Huh7细胞激活自噬，采用超速离心法和PEG6000沉淀法提取并鉴定其释放的Huh7-EVs;通过CCK-8法、划痕实验、 Transwell侵袭实验及克隆形成实验，评估NDV、 Huh7-EVs及其联合处理对Huh7细胞增殖、迁移、侵袭与克隆形成的影响；采用免疫荧光及免疫印迹检测自噬相关蛋白LC3B、 Beclin-1、 p62及JAK2/STAT3信号通路蛋白表达水平。饥饿预处理有效激活Huh7细胞自噬，获得高纯度EVs。Huh7-EVs与NDV联合应用较单独处理组更显著抑制Huh7细胞增殖、迁移、侵袭和克隆形成(P<0.05)。在机制上，联合处理可协同增强自噬相关蛋白LC3B、 Beclin-1表达，下调p62水平，并显著抑制JAK2/STAT3信号通路活性(P<0.001),提示其通过激活自噬通路和调控信号网络共同发挥抗肿瘤效应。综上，Huh7-EVs可协同增强NDV对肝癌细胞的抗肿瘤效应。Huh7-EVs联合NDV在体外可协同抑制肝癌细胞恶性行为，其机制可能与增强自噬活性及下调JAK2/STAT3信号通路有关。本研究为溶瘤病毒联合外囊泡治疗肝细胞癌提供了新思路和实验依据，具有潜在的临床转化价值。

关键词

肝细胞癌 / 新城疫病毒 / 细胞外囊泡 / 自噬 / JAK2/STAT3信号通路