头颈鳞癌细胞中DNA甲基化抑制p53、C/EBPβ及XBP-1结合到S100A9启动子

摘要

头颈部鳞状细胞癌(head and neck squamous cell carcinoma, HNSCC)是全球第七大常见癌症,其早期检出率低且侵袭性高,总体5年生存率不足50%。然而, S100A9在HNSCC细胞中下调的机制尚不明确。本研究旨在探讨S100A9启动子甲基化与其在HNSCC细胞中的表达关系,并揭示潜在的机制。研究结果表明, HNSCC组织的S100A9启动子甲基化程度低于癌旁正常组织。结果也表明, S100A9在颊黏膜TR146细胞中的mRNA及蛋白水平高于舌黏膜HSC-3、 HSC-4和SCC-4细胞;相比之下, S100A9启动子甲基化水平在TR146细胞中低于其他3种细胞。电泳迁移率变动分析(electrophoretic mobility shift assay, EMSA)结果表明,依据S100A9启动子CpG位点序列设计的探针可与TR146细胞多种核蛋白结合。通过多种抗体筛选发现p53、 CCAAT/增强子结合蛋白(CCAAT/enhancer-binding protein, C/EBP)β和X盒结合蛋白1(X-box binding protein1, XBP-1)能特异性结合S100A9启动子,染色质免疫沉淀实验(chromatin immunoprecipitation assay, ChIP)证实了其在体内的结合。此外, p53和XBP-1的敲低也显著下调了S100A9启动子活性。综上,这些结果表明在头颈鳞癌细胞中S100A9启动子甲基化与其表达存在显著的负相关性。S100A9启动子甲基化至少能通过干扰p53、 C/EBPβ和XBP-1的结合来抑制其转录活性,进而下调S100A9的表达。

关键词

头颈鳞状细胞癌 / S100A9 / 甲基化 / 转录因子