邻苯二甲酸单丁酯和邻苯二甲酸单（2-乙基己基）酯经cGAS/STING/NF-κB信号通路诱导小鼠睾丸间质细胞衰老的机制

摘要

目的 探讨邻苯二甲酸单丁酯（MBP）和邻苯二甲酸单（2-乙基己基）酯（MEHP）经环磷酸鸟苷-腺苷合成酶（cGAS）/干扰素基因刺激因子（STING）/核因子-κB（NF-κB）信号通路诱导小鼠睾丸间质细胞（TM-3细胞）衰老的机制。方法 对TM-3细胞分别进行400μmol·L^-1的MBP、MEHP单药处理及400μmol·L^-1MBP+400μmol·L^-1MEHP联合处理24 h后，光学显微镜下观察细胞形态，活性氧（ROS）检测以说明发生氧化应激，β-半乳糖苷酶（β-Gal）染色法检测细胞衰老程度，qPCR检测线粒体DNA（mtDNA）是否释放进入细胞质，RT-qPCR及Western blot分别检测cGAS、STING、p65、p-p65、P16及P21的mRNA及蛋白表达量。结果 相比于对照组，MBP和MEHP染毒TM-3细胞出现扁平状态、空泡扩大，细胞发生皱缩。细胞内ROS水平升高，SA-β-Gal活性增加，mtDNA拷贝数增加，cGAS、STING、NF-κB、P16、P21的mRNA水平及蛋白水平均升高（P均<0.05）;MBP和MEHP联合染毒对TM-3细胞的ROS含量、SA-β-Gal活性、mtDNA拷贝数、衰老相关基因及蛋白表达水平具有拮抗作用（P均<0.01）。结论 MBP和MEHP可能通过cGAS/STING/NF-κB信号通路诱导小鼠睾丸间质细胞衰老，且表现为拮抗作用。

关键词

cGAS/STING/NF-κB / 小鼠睾丸间质细胞 / 细胞衰老 / 邻苯二甲酸单丁酯 / 邻苯二甲酸单(2-乙基己基)酯