雄激素通过PI3K/AKT/AR信号通路激活HMGB-1蛋白促进前列腺增生细胞自噬

摘要

目的 探讨雄激素通过PI3K/AKT/AR信号通路上调前列腺细胞高迁移率族蛋白B^-1(HMGB^-1)表达促进细胞自噬的可能机制。方法 培养人前列腺增生上皮细胞(BPH^-1)和人前列腺基质永生化细胞(WPMY^-1),CCK-8法检测不同浓度(1 pmol·L^-1、100 pmol·L^-1、1 nmol·L^-1、10 nmol·L^-1)丙酸睾丸素（TP）、TP单用/联用自噬抑制剂氯喹（CQ）干预细胞活性，Western blot检测自噬相关蛋白(Beclin^-1、LC3Ⅱ/Ⅰ、P62)、雄激素受体（AR）、HMGB^-1蛋白表达情况，HMGB^-1基因沉默、磷脂酰肌醇-3-激酶（PI3K）/蛋白激酶B（AKT）通路抑制剂渥曼青霉素（WM）阻断PI3K/AKT信号通路或AR基因沉默后验证HMGB^-1及自噬相关蛋白LC3表达变化。结果 与Control组相比，TP干预后细胞增殖活力增强，自噬水平升高，HMGB^-1蛋白表达升高（P均<0.05）；与TP组相比，TP联用CQ后，TP诱导的细胞增殖活力减弱，自噬水平降低，HMGB^-1蛋白表达降低（P均<0.05）；沉默HMGB^-1基因后，自噬蛋白LC3B荧光强度明显减弱，LC3Ⅱ/Ⅰ表达降低（P均<0.05），联用TP后，HMGB^-1、LC3B蛋白荧光强度增强，HMGB^-1、LC3Ⅱ/Ⅰ蛋白表达升高（P均<0.05）；与Control组相比，TP干预后，细胞p-PI3K、p-AKT、AR、HMGB^-1、LC3Ⅱ/Ⅰ蛋白表达升高（P均<0.05），与单用WM组相比，TP联用WM后p-PI3K、p-AKT、AR、HMGB^-1、LC3Ⅱ/Ⅰ蛋白表达增高（P均<0.05）；沉默AR基因后，HMGB^-1、LC3Ⅱ/Ⅰ表达降低，联用TP后AR、HMGB^-1、LC3Ⅱ/Ⅰ表达升高（P均<0.05）。结论 雄激素可以通过PI3K/AKT/AR信号通路激活HMGB^-1蛋白上调，促进细胞自噬致前列腺细胞增殖。

关键词

良性前列腺增生 / 雄激素 / 自噬 / 雄激素受体