ApoE^-/-与Ddr2^ΔLysM双基因敲除小鼠构建及表型分析

摘要

目的 构建巨噬细胞盘状结构域受体2（Ddr2）条件性敲除及载脂蛋白E（ApoE）全身性敲除的双基因敲除小鼠模型，并对其肝脏表型进行分析，为探究巨噬细胞中Ddr2在代谢相关脂肪性肝病（MAFLD）的作用机制提供动物模型。方法 采用Cre/LoxP系统构建条件性基因敲除小鼠模型，具体操作为将Ddr2flox/flox雌性小鼠与LysMCre雄性小鼠交配，获得Ddr2巨噬细胞条件性敲除小鼠，即Ddr2^ΔLysM。将Ddr2^ΔLysM小鼠与ApoE^-/-小鼠杂交，得到Ddr2巨噬细胞条件性基因敲除与ApoE全身性基因敲除的ApoE^-/-；Ddr2^ΔLysM小鼠。通过PCR进行基因型鉴定，并利用Western blot验证其敲除效率。选取6周龄的实验组(ApoE^-/-；Ddr2^ΔLysM)小鼠及对照组(ApoE^-/-和Ddr2^ΔLysM)小鼠，进行高脂喂养12周，对小鼠的体质量和肝脏质量进行检测并计算肝体比，采用HE染色、油红O染色以及Masson染色技术观察肝脏组织病理学变化。结果 成功构建了ApoE^-/-；Ddr2^ΔLysM小鼠模型并且敲除效率大于90%（P<0.05）；高脂喂养12周后，ApoE^-/-；Ddr2^ΔLysM小鼠肝脏出现显著的脂肪病变，并伴有严重的炎症反应和胶原纤维沉积。结论 成功构建了ApoE^-/-与Ddr2^ΔLysM双敲除小鼠模型。

关键词

巨噬细胞 / 盘状结构域受体2 / 代谢相关脂肪性肝病 / 载脂蛋白E

基金资助

宁夏自然科学基金项目（2020AAC03144,2024AAC02041）; 宁夏卫生健康系统科研课题（2022-NWKY-049）