EB病毒潜伏膜蛋白2A重塑多发性骨髓瘤肿瘤微环境的机制

摘要

目的 探究EB病毒（EBV）潜伏膜蛋白（LMP）2A对骨髓瘤细胞株（KMM-1）中趋化因子受体4(CXCR4)基因的表达及其重塑多发性骨髓瘤肿瘤微环境的机制。方法 将LMP2A蛋白表达于KMM-1细胞株内，荧光定量PCR检测LMP2A、CXCR4的mRNA表达，Western blot检测LMP2A、CXCR4蛋白表达，CCK-8法检测KMM-1细胞增殖情况；将构建的C-X-C基序趋化因子配体12(CXCL12)/CXCR4干扰质粒分别转染乳腺癌相关成纤维细胞（BCAFs）和KMM-1细胞，观察每组中BCAFs形态、数量，Transwell法检测BCAFs细胞迁移能力。结果 si-LMP2A组相对于对照组LMP2A和CXCR4的mRNA及蛋白表达量降低（P均<0.01）;CCK-8检测结果显示，LMP2A过表达稳转株+si-NC组的细胞活力均高于LMP2A过表达空载稳转株+si-NC组和LMP2A过表达稳转株+si-LMP2A组（P均<0.01）;Transwell法检测结果表明，与BCAFs与LMP2A过表达KMM-1稳转株+si-NC共培养组及BCAFs+si-NC组相比，其他各组BCAFs的迁移数量均减少（P均<0.01），其中si-CXCL12/si-CXCR4共培养组的迁移数量最少（P均<0.01）。结论 LMP2A可以上调骨髓瘤细胞中CXCR4基因表达并促进骨髓瘤细胞增殖，CXCL12/CXCR4轴可以重塑BCAFs微环境。

关键词

EB病毒潜伏膜蛋白2A / 多发性骨髓瘤 / CXCL12/CXCR4信号 / 癌相关成纤维细胞 / 肿瘤微环境