SPINK13基因对卵巢癌SKOV3细胞增殖、凋亡、侵袭和迁移的影响

摘要

目的 探索丝氨酸肽酶抑制剂Kazal 13型（SPINK13）基因在卵巢癌SKOV3细胞中发挥功能作用与可能的相关机制。方法 免疫组化检测人卵巢癌组织芯片（HOvaC151Su01）中SPINK13蛋白的表达，分析癌组织和癌旁组织中的表达情况及不同临床特征中表达的差异性。在人卵巢癌SKOV3细胞系中对SPINK13基因分别进行过表达和沉默，CCK-8检测细胞增殖能力，流式细胞术检测细胞凋亡，Transwell检测细胞侵袭，细胞划痕检测细胞迁移；Western blot检测SPINK13、MMP2和MMP9蛋白相对表达量，ELISA检测细胞培养上清中MMP2、MMP9、VEGF和TGF-β1的蛋白含量。结果 SPINK13蛋白在癌组织中的表达低于癌旁组织（P<0.05），其与病理分级、T分期、N分期、M分期和肿瘤大小相关（P均<0.05）。Western blot结果证实成功构建了SPINK13基因的过表达和沉默的SKOV3细胞系。相比于Control组，Oe-SPINK13组细胞增殖能力降低（P<0.05），细胞凋亡率升高（P<0.05），细胞侵袭数目降低（P<0.05），细胞迁移率降低（P<0.05）,SPINK13 shRNA组则相反（P均<0.05）。Oe-SPINK13组细胞中MMP2和MMP9蛋白相对表达量均降低（P均<0.05），培养上清中MMP2、MMP9、VEGF和TGF-β1蛋白含量均降低（P均<0.05）,SPINK13 shRNA组则相反（P均<0.05）。结论 SPINK13在卵巢癌SKOV3细胞发挥抑制癌细胞增殖、迁移和侵袭的功能作用，其机制可能与抑制细胞外基质因子的表达有关。

关键词

丝氨酸肽酶抑制剂Kazal 13型基因 / 卵巢癌 / 抑癌功能