KDM5C基因c.26T>A突变致Claes-Jensen综合征的临床研究

摘要

目的 探讨KDM5C基因c.26T>A突变在Claes-Jensen综合征中的作用。方法 采用全外显子测序筛查突变，Sanger测序验证变异，毛细管电泳分析X染色体失活状态。通过Pymol构建蛋白结构模型，VarCards评估突变有害性，并结合分子动力学模拟分析蛋白稳定性。通过瞬时转染慢病毒包装的KDM5C突变型（mt）、野生型（wt）及空载质粒至N2a细胞，设正常细胞对照组（ctrl）和空载阴性对照组（mock）。采用荧光显微镜观察诱导分化后神经细胞突起的长度，并利用蛋白免疫印迹检测KDM5C、Tuj-1及PSD-95蛋白表达水平。结果 先证者在KDM5C基因中存在错义突变c.26T>A(p.L9Q)，经Sanger测序验证为母源遗传。该突变引入额外共价键，改变蛋白结构，VarCards及分子动力学模拟均提示其可能为功能缺失性突变，且影响蛋白稳定性。细胞实验显示，与正常对照组相比，突变组神经突起长度减小（P<0.05）,KDM5C蛋白表达降低（P<0.01）,PSD-95蛋白表达也下降（P<0.01），而Tuj-1蛋白表达无变化；过表达组KDM5C蛋白表达升高（P<0.05），但神经突起长度差异无统计学意义（P>0.05）。结论 本研究明确了KDM5C基因p.L9Q突变为致病原因，该突变可损害神经突起生长，且拓展了KDM5C基因相关疾病的突变谱系，并提示该基因在神经发育中的关键作用。

关键词

Claes-Jensen综合征 / KDM5C基因 / 错义突变 / 全外显子测序技术 / 分子动力学模拟 / 智力发育迟缓