大黄黄连炙甘草汤改善IR-HepG2细胞糖脂代谢及胰岛素抵抗的作用

摘要

目的 探讨大黄黄连炙甘草汤（DHZD）对胰岛素抵抗（IR）肝细胞糖脂代谢及凋亡的影响，并分析其与IRS2/PI3K/AKT/FOXO1信号通路的关系。方法 采用人肝癌HepG2细胞系，以1μmol·L^-1胰岛素诱导24 h构建IR模型。实验设正常对照（Control）组、IR模型组、DHZD干预组(1μg·mL^-1)、原方大黄黄连泻心汤（DHXD）干预组(1μg·mL^-1)和二甲双胍阳性药物组(Met,2 mmol·L^-1)。采用葡萄糖氧化酶法检测细胞葡萄糖消耗量与葡萄糖生成量；采用PAS染色检测糖原含量；采用BODIPY 493/503荧光染色检测脂质蓄积；采用Western blot和RT-qPCR技术检测IRS2/PI3K/AKT/FOXO1通路蛋白及mRNA表达水平；采用流式细胞术（Annexin V-FITC/PI双染法）检测细胞凋亡率。结果 与Control组比较，IR组葡萄糖消耗量减少、葡萄糖生成量增加、糖原含量降低、脂质蓄积增加（P均<0.05）,IRS2、PI3K、FOXO1的蛋白与mRNA表达均下调（P均<0.05）。DHZD干预能逆转上述糖脂代谢异常（P<0.05）。在促进葡萄糖消耗、上调PI3K/FOXO1表达以及降低总凋亡率等方面，DHZD的效果均优于原方DHXD组（P<0.05）。DHZD的作用与上调IRS2/PI3K/AKT/FOXO1信号通路关键分子的表达相关（P<0.05）。结论 DHZD可改善IR-HepG2细胞糖脂代谢紊乱并抑制凋亡，其作用机制可能与上调IRS2/PI3K/AKT/FOXO1信号通路关键分子的表达有关。

关键词

大黄黄连炙甘草汤 / IRS2/PI3K/AKT/FOXO1信号通路 / 2型糖尿病 / 糖脂代谢紊乱 / 细胞凋亡