白藜芦醇对肾结石小鼠肾小管上皮细胞中氧化应激损伤和细胞凋亡的保护作用

摘要

目的 探讨白藜芦醇对肾结石小鼠肾小管上皮细胞中氧化应激损伤和细胞凋亡的保护作用。方法 15只ICR小鼠随机分成对照组、模型组和白藜芦醇治疗组，每组5只。对照组小鼠正常喂养，模型组给予混有5%羟脯氨酸的饲料，构建肾结石小鼠模型，白藜芦醇治疗组为模型组+20 mg·kg^-1白藜芦醇，干预28 d后摘取肾脏组织，分离并培养原代肾小管上皮细胞。利用q-PCR检测肾小管上皮细胞Caspase 3、Bcl-2及Bax的表达情况；利用流式细胞术检测各组小鼠肾小管上皮细胞凋亡情况；利用试剂盒检测氧化应激指标丙二醛（MDA）、超氧化物歧化酶（SOD）、过氧化氢酶（CAT）和谷胱甘肽（GSH）的变化。采用q-PCR和ELISA检测肾小管上皮细胞纤维化指标α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）、Ⅰ型胶原蛋白（CollagenⅠ）和Ⅲ型胶原蛋白（CollagenⅢ）的变化；采用RTq-PCR和Western blot检测PI3K、AKT蛋白相对表达量的变化。结果 与对照组相比，模型组小鼠肾小管上皮细胞中Caspase 3、Bcl-2及Bax mRNA表达情况上升（P<0.05），凋亡细胞数量增加（P<0.05）;MDA含量上升、SOD、CAT和GSH的含量液降低（P均<0.05）;α-SMA、CollagenⅠ和CollagenⅢ的表达水平上升；磷脂酰肌醇-3-激酶（PI3K）和丝氨酸/苏氨酸激酶（AKT）蛋白的表达水平上升。与模型组相比，白藜芦醇治疗组Caspase 3、Bax mRNA表达情况下降、Bcl-2表达水平上升（P均<0.05）,MDA含量下降、SOD、CAT和GSH的含量增加（P均<0.05），纤维化指标α-SMA、CollagenⅠ和CollagenⅢ的表达水平均下降（P均<0.05）;PI3K和AKT蛋白相对表达水平均降低（P均<0.05）。结论 白藜芦醇能够降低肾小管上皮细胞氧化应激和细胞凋亡改善肾结石对肾脏损伤，可能与PI3K/AKT信号通路有关。

关键词

肾结石 / 白藜芦醇 / 细胞凋亡 / 氧化应激