生姜细胞外囊泡对炎性微环境下成纤维细胞活化的抑制作用

摘要

目的 探讨生姜细胞外囊泡（G-EXVs）在白细胞介素-6（IL-6）和肿瘤坏死因子-α（TNF-α）联合诱导的炎性微环境中对成纤维细胞（FBs）活化的抑制作用。方法 采用差速离心法分离G-EXVs，通过透射电子显微镜（TEM）和纳米颗粒跟踪分析技术（NTA）对其进行鉴定；以CCK-8法筛选IL-6和TNF-α的最佳诱导浓度；并设置不同处理组，通过CCK-8与Western blot检测细胞增殖及α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）的表达水平，构建并验证炎性微环境模型；同时评估G-EXVs对人皮肤成纤维细胞（BJ）活化的抑制作用；最后通过构建大鼠背部伤口创面，分组处理后检测创面愈合率，评估G-EXVs对大鼠背部皮肤FBs活化的抑制作用。结果 TEM显示，G-EXVs呈典型茶托状或单侧凹陷半球形结构，NTA显示其颗粒平均直径为159.4 nm，颗粒浓度达5.6×10～6 Particles·mL^-1；与C组相比，确定TNF-α和IL-6最适诱导浓度均为25 ng·mL^-1，该浓度下BJ数量增加明显（P均<0.01）;25 ng·mL^-1的TNF-α和IL-6可成功构建炎性微环境模型，表现为I1+T1组BJ数量及α-SMA表达水平均上调（P均<0.01）；此外，G-EXVs可抑制FBs活化，表现为I2+T2+G组BJ数量、α-SMA表达水平均下调，且I3+T3+G1组创面愈合率明显加快（P<0.05或<0.01）。结论 G-EXVs对炎性微环境下FBs活化具有抑制作用。

关键词

生姜细胞外囊泡 / 成纤维细胞 / 炎性微环境 / 创面愈合率