microRNA-214-3p靶向ATG13调控胃癌自噬的机制研究

摘要

目的 研究microRNA-214-3p(miR-214)对胃癌细胞自噬的影响，并阐明其调控机制。方法 将慢病毒LV-miR-214 inhibitor和空慢病毒载体LV-NC分别转染人胃癌细胞株AGS，用实时荧光定量PCR(qRTPCR)测定转染的人LV-AGS-NC和LV-AGS-miR-214 inhibitor中miR-214的表达水平；通过透射电镜和免疫荧光观察miR-214对胃癌细胞自噬的影响；蛋白印迹实验检测不同转染组细胞中ATG5、LC3Ⅱ的表达水平；通过qRT-PCR、蛋白印迹实验及荧光素酶报告基因实验验证miR-214与ATG13的靶向关系。结果 AGS细胞转染慢病毒LV-miR-214 inhibitor后，miR-214的表达较阴性NC组降低（P<0.05）；透射电镜结果显示，下调miR-214后胃癌细胞的自噬小体减少；免疫荧光观察下调miR-214后LC3荧光斑点减少；蛋白印迹实验显示，抑制miR-214表达后ATG5、LC3Ⅱ的表达降低，ATG13的表达升高；qRT-PCR实验显示，抑制miR-214表达后，ATG13的表达升高；荧光素酶报告基因实验表明miR-214靶向ATG13。结论 miR-214可能通过靶向ATG13促进胃癌细胞自噬，从而影响胃癌的进展。

关键词

microRNA-214-3p / 胃癌 / 自噬 / ATG13