橡胶树蛋白激酶基因SnRK2.7的克隆及表达

摘要

为了探索蔗糖非发酵相关蛋白激酶2(Sucrose non-fermentating1-related protein kinase 2,SnRK2)在巴西橡胶树响应低温胁迫应答中的作用，采用RT-PCR技术，从橡胶树抗寒无性系93-114的叶片中克隆了SnRK2亚家族的一个成员，命名为HbSnRK2.7。该基因包含一个1 095 bp的开放阅读框，编码364个氨基酸。HbSnRK2.7的分子量为41.39 kD，等电点为4.70，具有保守丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶结构域，预测其能催化磷酸基从ATP转移到蛋白质底物上的丝氨酸/苏氨酸残基上，也是磷酸化位点的集中区域，还具有非生物胁迫所需的结构域和ABA（脱落酸）依赖的HbSnRK2.7激活所需结构域。q-PCR结果显示，HbSnRK2.7基因响应ABA诱导，呈下调表达模式。在ABA处理8 h时，表达量下调到最低点。在低温胁迫下，HbSnRK2.7的表达量极显著降低。低温胁迫4 h和8 h时，HbSnRK2.7持续下调表达，低温胁迫24 h时，HbSnRK2.7表达量下调到最低，大约为非胁迫表达量的1/2。而且，HbSnRK2.7在不抗寒种质中的表达量显著高于抗寒种质。这些结果表明，HbSnRK2.7可能作为负调控因子介导橡胶树依赖ABA的低温胁迫抗性形成。

关键词

巴西橡胶树 / 蔗糖非发酵相关蛋白激酶 / 荧光定量PCR / 低温胁迫抗性 / 脱落酸信号途径