植物原生质体分离及其瞬时转化的应用

马超越; 彭世清; 郭冬; 朱家红; 王颖

doi:10.15886/j.cnki.rdswxb.20230026

热带生物学报 ›› 2024, Vol. 15 ›› Issue (02) : 241 -250. DOI: 10.15886/j.cnki.rdswxb.20230026

植物原生质体分离及其瞬时转化的应用

马超越, 彭世清, 郭冬, 朱家红, 王颖

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摘要

原生质体已被广泛应用于亚细胞定位、基因表达分析、蛋白-蛋白互作、基因编辑等方面。笔者总结了酶解法分离植物原生质体的影响因素，电穿孔和PEG介导的方法对原生质体瞬时转化效率的影响和瞬时转化的应用。植物的种类、不同的PEG浓度、转染时间、DNA浓度和原生质体数量都会影响PEG介导法对原生质体瞬时转化效率。电穿孔法必须在脉冲电压、脉冲长度、脉冲数、细胞数、DNA浓度都适宜的条件下才能达到最佳转化效率。本文为更多植物原生质体分离体系和瞬时转化体系的建立提供参考。