pSETsac B质粒构建及其对达卡气单胞菌kdp E基因的有痕与无痕敲除效率评价

凌博; 陈丽青; 王宇; 杨诺; 范丽霞; 郭桂英; 李雪松; 曾纪锋; 李迁; 郑继平

doi:10.15886/j.cnki.rdswxb.20230056

热带生物学报 ›› 2024, Vol. 15 ›› Issue (04) : 452 -459. DOI: 10.15886/j.cnki.rdswxb.20230056

pSETsac B质粒构建及其对达卡气单胞菌kdp E基因的有痕与无痕敲除效率评价

凌博, 陈丽青, 王宇, 杨诺, 范丽霞, 郭桂英, 李雪松, 曾纪锋, 李迁, 郑继平

作者信息 +

Author information +

文章历史 +

PDF

摘要

为构建一种新型基因敲除质粒，以pSET4s和pK18mobsac B质粒为基础，通过PCR和酶切连接的方法，构建了新质粒pSETsac B，然后以pK18mobsac B质粒为对照，评价新建质粒对达卡气单胞菌kdp E基因的有痕敲除（带有四环素筛选标记）和无痕敲除效率。结果表明，两种质粒在有痕敲除效率上无差别，但在无痕敲除上，pSETsac B的敲除效率显著高于对照质粒pK18mobsac B。由于p SETsac B为穿梭性温敏质粒，因此，该质粒可望在革兰氏阳性和阴性菌的遗传机制研究中皆可发挥作用，本研究同时也为检视kdp E基因在达卡气单胞菌中的功能提供了前期的突变体材料。