利用酵母双杂交筛选槟榔黄化相关病毒p26的宿主互作蛋白

梁泳琪; 王雨天; 高保森; 赵瑞白; 王洪星; 李瑾; 曹先梅

doi:10.15886/j.cnki.rdswxb.20250066

热带生物学报 ›› 2026, Vol. 17 ›› Issue (01) : 91 -100. DOI: 10.15886/j.cnki.rdswxb.20250066

利用酵母双杂交筛选槟榔黄化相关病毒p26的宿主互作蛋白

梁泳琪, 王雨天, 高保森, 赵瑞白, 王洪星, 李瑾, 曹先梅

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摘要

槟榔黄化病（yellow leaf disease,YLD）是严重威胁海南槟榔（Areca catechu L.）产业的病害，其致病因子槟榔黄化相关病毒（areca palm velarivirus 1,APV1）编码的p26蛋白在病毒侵染中发挥关键作用，但是与其宿主相互作用的蛋白还未明确。本研究采用酵母双杂交技术筛选槟榔cDNA文库，以p26为靶标筛选互作因子。成功构建pGBKT7-p26诱饵载体并通过毒性及自激活检测，确认其适用于互作筛选体系。之后通过筛库获得6个候选互作蛋白，包括Ras相关蛋白RABE1c、叶绿体铁蛋白（ferritin-4）、油棕应激蛋白PHOS34和三个未知功能蛋白。经复筛和测序比对，聚焦于含卷曲螺旋结构域的未知功能蛋白——卷曲螺旋结构域蛋白2（CHCHD2）。回转验证表明，p26与CHCHD2在酵母中存在特异性互作。生物信息学分析显示，CHCHD2分子式为C₆₂₈H_{1 007}N₂₀₁O₁₉₈S₈，分子质量14.8 kDa，属亲水性不稳定蛋白，二级结构以无规则卷曲为主，亚细胞定位预测定位于叶绿体，无信号肽及跨膜结构域。本研究揭示APV1的p26与宿主CHCHD2的互作关系，为解析p26在病毒侵染中的功能及CHCHD2介导的宿主防御机制提供了理论基础。