丹酚酸B改善急性肺损伤的作用研究

摘要

目的：探讨丹酚酸B(salvianolic acid B, SAB)对脂多糖(lipopolysaccharide, LPS)诱导急性肺损伤(acute lung injury, ALI)的影响。方法：体内采用LPS诱导小鼠模型，分为5组：空白组、LPS组(10 mg/kg)、LPS+地塞米松(dexamethasone,Dex)组[LPS+Dex(2 mg/kg)]、LPS+SAB低剂量组(25 mg/kg)、LPS+SAB高剂量组(50 mg/kg)。体外采用LPS诱导小鼠肺上皮细胞MLE-12细胞模型，分为空白组、LPS组(50 mmol/L)、LPS+Dex组(1μmol/L)、LPS+SAB低剂量组(10μmol/L)、LPS+SAB高剂量组(20μmol/L)。末次给药24 h后检测各组小鼠血常规指标[WBC、中性粒细胞(neutrophils, NEU)、淋巴细胞(lymphocytes, LYM)]，肺功能指标[肺总阻力(lung resistance, RL)、肺出气阻力(pulmonary expiratory resistance, Re)、肺动态顺应性(lung dynamic compliance, Cydn)、呼气峰值流速(peak expiratory flow rate, PEF)和最大通气量(maximum ventilation volume, MVV)]，检测小鼠肺湿干比重(wet dry ratio, W/D)、髓过氧化物酶(myeloperoxidase, MPO)、检测小鼠血清与MLE-12细胞上清液TNF-α、IL-1β和IL-6、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase, SOD)、丙二醛(malondialdehyde, MDA),H-E染色观察小鼠肺组织病理改变，Western Blot检测小鼠与MLE-12细胞NOD样受体家族含pyrin结构域蛋白3(NOD-like receptor family pyrin domain-containing protein 3, NLRP3)/凋亡相关颗粒样蛋白(apoptosis-associated speck-like protein containing a CARD, ASC)/Caspase-1/IL-1β通路蛋白表达。构建NLRP3沉默的MLE-12细胞株验证SAB的作用。结果：与空白组比较，LPS组小鼠体质量在造模后显著下降，而LPS+SAB组差异无统计学意义。与空白组比较，LPS组小鼠WBC、NEU、LYM水平均升高。与LPS组比较，LPS+SAB组WBC、NEU、LYM显著降低。与空白组比较，LPS组肺功能指标RL、Re水平升高，Cydn、PEF、MVV水平降低，与LPS组比较，LPS+SAB组RL、Re水平显著降低，Cydn、PEF、MVV显著升高。SAB显著降低脓毒症小鼠肺W/D和MPO。SAB显著降低了小鼠血清和MLE-12细胞上清液中TNF-α、IL-1β和IL-6水平、升高SOD水平与降低MDA水平。Western Blot实验显示SAB显著降低小鼠肺组织和MLE-12细胞中的NLRP3、ASC、Caspase-1和IL-1β的蛋白表达水平。当沉默NLRP3后，SAB的药效显著增强。结论：SAB显著减轻LPS诱导的ALI，其机制与抑制NLRP3相关，为治疗脓毒症ALI提供了潜在的药物。

关键词

急性肺损伤 / 丹酚酸B / NOD样受体家族pyrin结构域含Pyrin结构域蛋白3 / 小鼠