激酶NEK6调控STAT3信号通路促进骨肉瘤细胞转移并抑制凋亡

摘要

目的：骨肉瘤源于骨骼系统，由于其分子机制复杂，目前治疗手段有限。丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶有丝分裂基因A相关表达激酶6(nerve in mitosis gene A-related expressed kinase 6, NEK6)可以调控细胞周期和多种致癌信号通路。本研究旨在分析NEK6在骨肉瘤中的表达及对其转移和细胞凋亡的调控作用。方法：收集骨肉瘤患者的肿瘤组织及正常组织，用实时定量PCR(real-time-quantitative PCR, RT-qPCR)检测NEK6的mRNA表达，以及在骨肉瘤细胞MG-63和Saos-2中，用RT-qPCR、Western Blot和免疫荧光检测NEK6的表达，进一步用siRNA抑制NEK6表达，通过CCK-8、细胞划痕、Transwell和流式细胞术等方法观察对骨肉瘤细胞增殖、迁移、侵袭和凋亡的影响。用Western Blot检测STAT3磷酸化水平及凋亡、转移相关蛋白的表达。结果：NEK6在骨肉瘤组织及细胞系中均高表达；siRNA抑制NEK6表达后，骨肉瘤细胞的增殖、迁移和侵袭得到抑制并促进了细胞凋亡。STAT3磷酸化水平增高，转移相关基因基质金属蛋白酶(matrix metallopeptidase, MMP)-2和MMP-9表达下降，促凋亡基因Bax上调，抑凋亡基因Bcl-2下调。结论 ：NEK6是骨肉瘤潜在的促癌基因，抑制NEK6可以抑制骨肉瘤细胞的增殖、迁移和侵袭并促进凋亡。NEK6可以通过激活STAT3信号通路促进骨肉瘤的转移和抑制凋亡，用siRNA等方法抑制NEK6的策略可能是治疗骨肉瘤的有效方法。

关键词

骨肉瘤 / 有丝分裂基因A相关表达激酶6 / 转移 / 凋亡

基金资助

南通市自然科学基金; 社会民生科技计划项目(MSZ2023126)