菟丝子黄酮对H2O2诱导的COV434人卵巢颗粒细胞氧化应激的影响

摘要

目的 研究菟丝子黄酮（flavonoid from semen cuscutae，FSC）对过氧化氢（H₂O₂）诱导的人卵巢颗粒细胞氧化应激的影响以及可能相关的作用机制。 方法 使用不同浓度H₂O₂处理人卵巢颗粒细胞（COV434）2h，用CCK⁃8检测法评估细胞增殖活力，以确定构建细胞外氧化应激模型的H₂O₂刺激浓度；检测不同浓度的FSC对细胞的毒性作用；使用25μg/mL、50μg/mL、100μg/mL、200μg/mL、400μg/mL的FSC处理氧化应激模型组细胞，CCK⁃8法检测FSC对细胞增殖活力的影响。根据处理条件将细胞分为四组：Control组，FSC组，H₂O₂组，FSC+H₂O₂组，使用CCK⁃8检测细胞增殖率，活性氧（ROS）试剂盒测定细胞内ROS含量，采用Western blot测定AMPK、P⁃AMPK、Bax和P53蛋白的表达量。 结果 0.5mmol/L的H₂O₂处理2h为构建COV434细胞氧化应激模型最佳条件。同时，100μg/mL FSC处理24h为最佳预处理条件。H₂O₂处理后细胞增殖活力下降，ROS水平上升，FSC处理可以降低ROS水平。Western Blot结果表明，H₂O₂处理后P⁃AMPK蛋白表达下调，P53和Bax表达升高，而FSC可以逆转这一趋势。 结论 H₂O₂可能通过抑制 AMPK 通路进而影响下游P53、Bax的表达，FSC可逆转H₂O₂所致的COV434细胞氧化损伤这一作用。

关键词

卵巢功能不全｜菟丝子黄酮｜氧化应激