菜心茎尖原生质体酶解体系构建

摘要

优化果胶酶、纤维素酶、离析酶含量和酶解时间，建立适用于菜心茎尖原生质体制备的方法，以期为菜心茎尖单细胞转录组测序提供可靠细胞来源。实验结果表明，纤维素酶、果胶酶、离析酶的质量分数分别为1.50%,0.50%,0.60%组合，酶解2 h可获得最佳的菜心茎尖原生质体产量和活性。进一步验证表明，该体系在菜心不同发育时期茎尖的原生质体分离中均表现出良好的适用性。原生质体产量分别为2.90×10～7 ,2.62×10～7 ,2.47×10～7个/g，活性比例均高于92%。所获得的原生质体数量及活性均达到单细胞转录组测序的严格标准，表明该酶解体系可为菜心茎尖单细胞研究提供高质量的细胞样本。

关键词

菜心 / 原生质体 / 酶解体系

基金资助

国家自然科学基金(32002028); 广东省自然科学基金(2022A1515010647); 广东石油化工学院大学生创新训练项目(S202211656104)