基于Nrf2/HO-1通路探讨反-查耳酮对肠上皮细胞铜死亡的影响

摘要

目的 基于Nrf2/HO-1信号通路探究反-查耳酮对肠上皮细胞铜死亡的影响。方法 通过30mg/mL DSS联合CuCl₂诱导NCM460细胞，建立溃疡性结肠炎体外细胞铜死亡模型，给予反-查耳酮处理24h,采用CCK-8法检测细胞活力；细胞铜离子试剂盒检测铜离子浓度；GSH试剂盒检测细胞GSH水平；活性氧（ROS）试剂盒检测细胞ROS水平；ELISA法检测细胞炎症因子（TNF-α、IL-1β、IL-6）水平。用Western blot检测铜死亡相关标志物（FDX1、LIAS）和Nrf2/HO-1信号通路蛋白表达。结果 30mg/mL DSS联合30μmol/L CuCl₂处理的NCM460细胞活力显著下降，铜死亡标志物铜离子水平、GSH、ROS水平显著变化，炎性细胞铜死亡模型构建成功。30μmol/L反-查耳酮可有效逆转DSS+CuCl₂诱导的细胞活力下降，有效抑制炎症因子分泌，下调胞内铜离子和ROS水平，增强GSH水平；反-查耳酮调控DSS+CuCl₂诱导的细胞铜死亡标志蛋白FDX1和LIAS及Nrf2/HO-1信号通路相关蛋白表达（P均<0.05）。结论 反-查耳酮可能通过调控Nrf2/HO-1信号通路减轻DSS和CuCl₂诱导的肠上皮细胞铜死亡。

关键词

反-查耳酮 / 溃疡性结肠炎 / 肠上皮细胞 / 铜死亡 / Nrf2/HO-1信号通路

基金资助

湖北省科技厅面上项目(2023AFB1120); 湖北省教育厅科学研究计划项目(D20242804); 湖北科技学院校内科研发展基金项目医学部专项(2023YKY07); 口腔与眼视光医学院专项(2021WG02)