大鼠VDAC1腺病毒过表达载体构建及功能鉴定

摘要

目的 构建电压依赖性阴离子通道蛋白1(VDAC1)腺病毒过表达载体，并观察其在H9C2细胞中的表达情况，为探究VDAC1在心肌细胞缺血再灌注损伤中的作用机制奠定基础。方法 构建ADV6-NC腺病毒及ADV6-VDAC1腺病毒，取第6代H9c2心肌样细胞用于转染。转染细胞分为3组：空白对照组、阴性对照组(转染ADV6-NC腺病毒)和实验组(转染ADV6-VDAC1腺病毒)。通过qPCR和蛋白免疫印迹实验检测各组细胞VDAC1的表达情况。结果 成功构建ADV6-NC及ADV6-VDAC1,实验组的VDAC1表达量明显高于空白对照组和阴性对照组，差异具有统计学意义(P<0.05)。结论 利用腺病毒载体可使H9c2细胞在体外持续高效表达VDAC1。

关键词

电压依赖性阴离子通道蛋白1 / 肌细胞 / 质粒构建 / 腺病毒载体