藤黄酸对脓毒症大鼠肠道损伤的保护作用

摘要

目的 探讨藤黄酸（GA）对脓毒症大鼠肠损伤的影响以及对RIP1/RIP3/MLKL信号通路的调节作用。方法 取40只SPF级SD大鼠，按随机数字表法分为假手术（Sham）组、脓毒症（Spesis）组、低剂量GA组和高剂量GA组，各10只。除Sham组外，其余3组大鼠均采用盲肠穿孔结扎法（CLP）建立脓毒症大鼠模型。低剂量GA组和高剂量GA组于造模前24 h分别灌胃给予50、100 mg·kg^-1 GA。造模后12 h麻醉处死，收集外周血和小肠组织。采用酶联免疫吸附（ELISA）法检测血清中肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白介素1β（IL-1β）和白介素6（IL-6）表达水平；苏木素-伊红（HE）染色观察小肠组织病理变化并进行Chui’s评分；蛋白免疫印迹（Western blotting）法检测凋亡相关蛋白（Caspase-3、Bax和Bcl2）、紧密连接蛋白（ZO-1和Occludin）及RIP1/RIP3/MLKL信号通路相关蛋白的表达水平。结果 与Sham比较，Spesis组大鼠肠黏膜受损明显，Chui’s评分显著升高（P<0.05）;血清中炎性因子TNF-α、IL-1β、和IL-6表达明显增加（P<0.05）;小肠组织中Bax、ZO-1和Occludin蛋白表达明显降低（P<0.05）,而Caspase-3、Bcl2、MLKL、RIP1以及RIP3蛋白表达明显增加（P<0.05）;与Spesis组比较，低剂量GA组和高剂量GA组大鼠肠黏膜损伤均有不同程度改善，Chui’s评分均明显降低（P<0.05）;血清中炎性因子TNF-α、IL-1β、和IL-6表达均显著降低（P<0.05）;小肠组织中Bax、ZO-1和Occludin蛋白表达明显增加（P<0.05）,而Caspase-3、Bcl2、MLKL、RIP1以及RIP3蛋白表达明显降低（P<0.05）。结论 GA能够减轻脓毒症诱导的大鼠肠道损伤，这或许与RIP1/RIP3/MLKL信号通路密切相关。

关键词

藤黄酸 / 脓毒症 / 肠道损伤 / 炎症反应 / 信号通路 / 动物,实验 / 大鼠