DMU-212诱导凋亡及自噬抑制角膜新生血管形成

摘要

目的 探讨白藜芦醇类似物反式-3,4,5,4′-四甲基二苯乙烯（DMU-212）在抑制角膜新生血管（CNV）形成的过程中对细胞凋亡和自噬的影响。方法 选取人脐静脉内皮细胞（HUVEC）作为体外研究材料，随机将细胞分为6组，均使用10 ng·mL^-1 VEGF进行诱导处理，并分别暴露于0、10、20、40、80、120μmol·L^-1 DMU-212,用CCK-8法检测各组细胞增殖；分别通过划痕实验和管腔形成实验检测对照组(0μmol·L^-1 DMU-212处理)和DMU-212组(40μmol·L^-1 DMU-212处理)的细胞迁移能力和血管形成能力；通过蛋白免疫印迹实验检测2组凋亡和自噬相关蛋白表达水平；分别通过TUNEL实验和MDC实验检测2组细胞凋亡和自噬水平。结果 各DMU-212处理组与对照组相比，细胞增殖率总体呈现浓度依赖性抑制，差异显著（F=11.35,P<0.001）。与对照组相比，DMU-212组细胞迁移速率和管腔形成能力显著受到抑制（均P<0.01）;DMU-212组cleaved caspase3、cleaved caspase9、Bax、Cyto-c、ATG7、LC3-Ⅱ和Beclin 1蛋白相对表达量显著升高（P<0.05或P<0.01）,P62和Bcl2蛋白相对表达量显著降低（P<0.01）;DMU-212组凋亡探针和自噬探针的荧光强度均显著增加（P<0.05和P<0.01）。结论 DMU-212可诱导HUVECs凋亡并提高自噬水平，从而抑制新生血管的形成。

关键词

反式-3,4,5,4′-四甲基二苯乙烯 / 自噬 / 凋亡 / 角膜新生血管