RAD51C表达下调对小鼠卵巢癌体内成瘤和VEGF、NRP-2表达的调控

摘要

目的 探讨RAD51旁系同源基因C(RAD51C)表达下调对小鼠卵巢癌体内成瘤和血管内皮生长因子（VEGF）、神经纤毛蛋白-2(NRP-2)表达调控的影响。方法 使用A2780卵巢癌细胞，通过培养检测细胞中RAD51C的表达，构建3种RAD51C干扰载体（SiRNA-47、SiRNA-183和SiRNA-285）,并包装成慢病毒，转染细胞，逆转录实时定量聚合酶链式反应（RT-qPCR）验证转染效果，进行稳筛，构建稳转细胞株。使用Balb/c雌性裸鼠建立细胞系来源的异体移植肿瘤模型（CDX）模型，将18只建模成功的裸鼠分为3组：A2780细胞组（Control组）、A2780细胞+空载体对照组（NC组）、A2780细胞+RAD51C干扰组（Si-RAD51C组），每组各6只。Control组注射生理盐水，NC组注射空载慢病毒50μL,Si-RAD51C组注射RAD51C干扰慢病毒50μL。观察各组成瘤情况，取肿瘤组织，采用蛋白质印迹法（WB）、免疫组织化学检测RAD51C、VEGF、NRP-2蛋白表达情况。结果 RT-qPCR验证RAD51C干扰慢病毒转染效果以SiRAN-285最明显（P <0.05）。Si-RAD51C组与Control组、NC组比较瘤体的体积最小、重量也最轻，且RAD51C、NRP-2及VEGF蛋白的表达显著降低（P <0.05）。结论 RAD51C干扰慢病毒可抑制小鼠A2780卵巢癌细胞肿瘤的形成，且对RAD51C、NRP-2及VEGF蛋白的表达均有抑制作用。

关键词

RAD51旁系同源基因C / 卵巢癌 / 血管内皮生长因子 / 神经纤毛蛋白-2 / 裸鼠成瘤模型 / 体外实验 / 小鼠