细胞外囊泡对子宫内膜异位症相关性不孕的作用及其机制

摘要

目的 探讨细胞外囊泡（extracellular vesicles, EVs）在子宫内膜异位症（endometriosis,EMs）相关性不孕中的作用及其机制。方法 利用Exo-spinTM技术从10例健康育龄女性（H-EVs组）和10例EMs相关性不孕患者（E-EVs组）阴道黏液中分离EVs。以磷酸盐缓冲盐水（PBS）为对照（PBS组，n=10），将人类精子分别与H-EVs、E-EVs和PBS共培养，利用计算机辅助精液分析和伊红染色评估3组精子活力。以10只正常雌性小鼠为空白对照（NC组)，将含有60μL PBS、60μL H-EVs溶液、60μL E-EVs溶液的医用可吸收明胶海绵分别送入模型组（M组，n=10）、H-EVs阴道移植组（H-EVs-VT组，n=10）和E-EVs阴道移植组（E-EVs-VT组，n=10）雌鼠阴道，持续1个月；再将雌雄性小鼠同笼配对（雌雄比例4∶1），并在妊娠第9天收集雌鼠子宫、卵巢组织，通过组织病理学、流式细胞术、实时定量反转录PCR及蛋白质印迹法比较4组雌鼠的生育力。结果 人EVs形态呈直径为50～200 nm的圆形或椭圆形结构，E-EVs可降低精子运动能力及存活率，而H-EVs能增加精子运动能力及存活率（P<0.05）。动物实验显示：与NC组比较，E-EVs可诱导促炎因子TGFβ1、IL-6、IL-17A和转录因子ROR-γt的释放导致Th17/Treg失衡，降低EMs小鼠的妊娠率及胚胎着床数目（P<0.05）；而H-EVs可增加抗炎因子IL-10和转录因子Foxp3的表达从而缓解Th17/Treg失衡，增加EMs小鼠的妊娠率及胚胎着床数目（P<0.05）。结论 阴道黏液EVs可调控精子活力，并介导EMs相关的炎症因子释放来调节Th17/Treg平衡，从而影响生育能力，这为EMs相关性不孕的机制提供新的解释。

关键词

子宫内膜异位症 / 不孕 / 细胞外囊泡 / 人类精子 / Th17/Treg / 动物,实验 / EMs小鼠