大黄蛰虫丸调控巨噬细胞自噬及极化抑制食管癌细胞恶性生物学行为

摘要

目的 探讨大黄蛰虫丸（dahuang zhechong pill,DHZCW）对巨噬细胞自噬及极化的调控作用，并进一步分析其对食管癌（EC）细胞恶性生物学行为的影响。方法 采用噻苯酮酯（PMA）诱导人外周血单核细胞系THP-1细胞分化为巨噬细胞，随机分为对照组、DHZCW组及DHZCW+三甲胺N-氧化物（trimethylamine-N-oxide dihydrate,TMAO）组。采用免疫荧光法检测自噬标志物LC3及极化标志物CD86、CD206的表达水平，透射电子显微镜观察自噬体数量，Western blot法检测LC3B-Ⅱ/LC3B-Ⅰ比值，ELISA法检测TNF-α和IL-1β水平。进一步将不同条件处理的巨噬细胞上清液用于人食管癌细胞系ECA109细胞培养，采用CCK-8法检测细胞增殖，Transwell实验检测细胞迁移和侵袭能力。结果 与对照组相比，DHZCW处理可显著降低巨噬细胞LC3荧光强度（P<0.01）、自噬体数量（P<0.05）及LC3B-Ⅱ/LC3B-Ⅰ比值（P<0.01），而TMAO处理后上述指标变化均被部分逆转（P<0.05或P<0.001）;DHZCW处理可显著提高巨噬细胞CD86表达水平（P<0.01）及TNF-α、IL-1β分泌水平（P<0.001），显著降低CD206表达水平（P<0.01），而TMAO处理后上述指标变化均被部分逆转（P<0.01或P<0.001）。与对照组相比，DHZCW处理可显著抑制ECA109细胞的增殖（P<0.01）、迁移（P<0.001）和侵袭（P<0.001），而TMAO处理后细胞的增殖、迁移和侵袭能力明显恢复（P<0.05或P<0.001）。结论 大黄蛰虫丸能够通过抑制巨噬细胞自噬活性并促进M1型极化，增强炎症因子释放，从而改善肿瘤微环境并抑制食管癌细胞的增殖、迁移和侵袭。

关键词

大黄蛰虫丸 / 食管癌 / 巨噬细胞 / 自噬 / 极化