化浊方调控CD47-SIRPα轴对动脉粥样硬化胞葬作用的影响

摘要

目的 基于CD47/SIRPα信号通路探讨化浊方（HZR）对动脉粥样硬化（AS）病理进程中胞葬作用的影响。方法 体内实验采用高脂饲料喂养ApoE^-/-小鼠构建AS动物模型，随机分为模型组（MOD组）、阿托伐他汀阳性药组(Ator组，2.6 mg·kg^-1)及HZR低、中、高剂量干预组(HZR-L、HZR-M、HZR-H组，分别用9.49、18.98、37.96 g·kg^-1 HZR处理)，每组10只。另取10只C57BL/6J小鼠作为空白对照组（CON组），给予普通饲料喂养。各组干预12周后，采用试剂盒测定血清总胆固醇（TC）、甘油三酯（TG）、高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）及低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）的水平；油红O染色、苏木精-伊红染色及Masson三色染色观察小鼠主动脉病理学变化；RT-PCR检测主动脉组织中CD47、SIRPα的mRNA表达。体外实验分组与体内实验一致，以80μg·mL^-1氧化型低密度脂蛋白（ox-LDL）诱导RAW264.7细胞构建泡沫细胞模型，制备HZR含药血清、Ator含药血清及空白血清干预泡沫细胞。用CCK-8法检测细胞活力；油红O染色观察细胞内脂滴的沉积；流式细胞术测定巨噬细胞对凋亡细胞的吞噬率（胞葬率）；蛋白质印迹法检测细胞CD47、SIRPα蛋白表达。结果 体内实验中，与CON组比较，MOD组小鼠主动脉可见脂质空泡和炎症细胞浸润，内膜下大量泡沫细胞聚集形成斑块，斑块内胶原纤维含量减少，主动脉内腔变窄，血清TC、TG、LDL-C水平显著升高，血清HDL-C水平显著下降，主动脉组织CD47、SIRPα基因的mRNA表达水平均显著上调（均P<0.01）；与MOD组比较，HZR各剂量组小鼠主动脉组织上述现象得到改善，TC、TG、LDL-C、CD47、SIRPα呈剂量依赖性下降，HDL-C水平呈剂量依赖性升高（P<0.05或P<0.01），其中HZR-H组整体干预效果与Ator阳性药组相当（P>0.05）。体外实验中，与CON组比较，MOD组细胞内脂滴沉积量显著增多，巨噬细胞胞葬率显著下降，细胞中CD47、SIRPα蛋白表达水平均显著上调（均P<0.01）；与MOD组比较，HZR对RAW264.7细胞的干预效果呈剂量依赖性（P<0.05或P<0.01），其中HZR-H组对上述指标的改善程度与Ator阳性药组相当（P>0.05）。结论 HZR通过抑制CD47-SIRPα信号轴增强巨噬细胞的胞葬功能，减轻主动脉凋亡细胞堆积及脂质沉积，延缓AS的病理进展并增强斑块的稳定性。

关键词

动脉粥样硬化 / 化浊方 / 巨噬细胞 / 胞葬作用 / CD47-SIRPα信号通路

基金资助

江西省中医药管理局科技计划项目（2022A343）; 江西省自然科学基金资助项目（20232BAB216109）; 江西省卫生健康委科技计划项目（202310534）; 国家中医药管理局全国名老中医药专家龚子夫传承工作室项目（国中医药人教函[2022]75号）; 江西省名中医李维旭传承工作室建设项目（赣中医药科教函[2025]5号）