远隔缺血预适应对2型糖尿病脑梗死患者血浆外泌体miRNA差异表达的影响

摘要

目的 观察远隔缺血预适应（remote ischemic preconditioning,RIPC）对2型糖尿病脑梗死患者血浆外泌体miRNA差异表达的影响，探讨RIPC血浆外泌体miRNA神经保护的可能机制。方法 选取6名急性脑梗伴2型糖尿病入院成年男性，实验组3名在入院时常规治疗+RIPC治疗7 d留取静脉血；对照组3名在入院时常规治疗7 d留取静脉血。应用miRNA测序技术筛选不同组患者血浆外泌体中共同差异表达miRNA后，对其靶基因进行生信分析，利用定量聚合酶链反应验证其中差异表达的miR-126-5p。结果 对照组出院时与入院时相比有53个miRNA上调，有39个miRNA下调；与常规治疗出院时相比，患者接受常规治疗+R IPC后出院时有113个miRNA上调，125个miRNA下调；实验组出院时与入院时对比有127个miRNA下调，173个miRNA上调，差异有统计学意义（P<0.05)。GO及KEGG富集分析提示常规治疗+RIPC治疗后差异miRNA功能主要富集在信号转导、轴突导向和EGFR酪氨酸激酶抑制剂抵抗等方面；R IPC治疗后较对照组出院时差异miRNA功能主要富集在信号转导、泛素调节的蛋白酶水解和循环节律等方面，提示RIPC可能通过这些途径发挥作用。选择已被证实具有神经保护作用且显著差异表达的miR-126-5p作为靶基因，qPCR结果证实较单纯常规治疗，通过RIPC处理+常规治疗可以显著增加患者血浆外泌体中miR-126-5p的表达明显升高。结论本研究发现2型糖尿病脑梗患者RIPC+常规治疗较常规治疗可以引起多个miRNA差异表达。并对其靶基因进行了基因功能和通路富集分析，有助于了解2型糖尿病脑梗患者的发病机制和进展，对于RIPC后的血浆外泌体miRNA治疗2型糖尿病脑梗患者的神经保护作用评估进行了探索。

关键词

脑梗 / 远隔缺血预适应 / 外泌体 / 微小核糖核酸 / 生物信息学分析

基金资助

国家自然科学基金项目(82060337); 内蒙古自治区自然科学基金项目(2021LHMS08021); 深圳市龙岗区医疗卫生科技计划项目(LGKCYLWS2021000033,LGKCYLWS2023025); 深圳市南山区科技局项目(NSZD2024052); 深圳市科技计划项目基础研究面上项目(JCYJ20220531092412028,JCYJ20230807121306012)