四氢小檗碱调控miR-375影响TLR4/NF-κB信号通路对坏死性小肠结肠炎的治疗作用

摘要

目的 探究四氢小檗碱（THB）通过miR-375调节TLR4/NF-κB通路缓解坏死性小肠结肠炎大鼠的肠道炎症损伤。方法 将新生大鼠分为NC、NEC、THB组、THB+miR-375过表达组。HE染色观察肠组织病理变化；过表达miR-375;qRT-PCR检测TLR4 mRNA含量，ELISA试剂盒检测炎症因子IL-6、TNF-α的含量；免疫组化及Western Blotting检测TLR4/NF-κB通路及肠道屏障相关蛋白的表达。结果 与NC对照组相比，NEC组大鼠肠道中的miR-375及肠道损伤情况显著增加；相较于NEC组，THB组明显下调了miR-375的表达且该组大鼠肠道损伤情况改善。为了进一步验证四氢小檗碱对miR-375及TLR4/NF-κB通路的调节作用，过表达miR-375后，实验结果发现，THB+miR-375过表达组与NEC模型组肠道组织中TLR4/NF-κB的蛋白表达差异无统计学意义，且炎症因子IL-6、TNF-α的表达量在两组之间也无差异，四氢小檗碱可调节肠道屏障相关蛋白ZO-1、Occludin和Claudin-1蛋白的表达来起到改善肠道屏障的作用。结论 过表达miR-375可抑制四氢小檗碱对肠道组织损伤的保护作用，且促进了TLR4/NF-κB信号通路的激活，提示四氢小檗碱可能是通过抑制miR-375，进一步抑制TLR4/NF-κB通路的激活，从而保护肠道组织免受炎症损伤，且四氢小檗碱可有效改善肠道屏障作用，达到治疗坏死性小肠结肠炎的作用。

关键词

四氢小檗碱 / miR-375 / TLR4/NF-κB信号通路 / 坏死性小肠结肠炎