四氢小檗碱调控miR-375影响TLR4/NF-κB信号通路对坏死性小肠结肠炎的治疗作用

摘要

目的 探究四氢小檗碱（THB）通过miR-375调节TLR4/NF-κB通路缓解坏死性小肠结肠炎大鼠的肠道炎症损伤。方法 将新生大鼠分为NC、NEC、THB组、THB+miR-375过表达组。HE染色观察肠组织病理变化；过表达miR-375;qRT-PCR检测TLR4 mRNA含量，ELISA试剂盒检测炎症因子IL-6、TNF-α的含量；免疫组化及Western Blotting检测TLR4/NF-κB通路及肠道屏障相关蛋白的表达。结果 与NC对照组相比，NEC组大鼠肠道中的miR-375及肠道损伤情况显著增加；相较于NEC组，THB组明显下调了miR-375的表达且该组大鼠肠道损伤情况改善。为了进一步验证四氢小檗碱对miR-375及TLR4/NF-κB通路的调节作用，过表达miR-375后，实验结果发现，THB+miR-375过表达组与NEC模型组肠道组织中TLR4/NF-κB的蛋白表达差异无统计学意义，且炎症因子IL-6、TNF-α的表达量在两组之间也无差异，四氢小檗碱可调节肠道屏障相关蛋白ZO-1、Occludin和Claudin-1蛋白的表达来起到改善肠道屏障的作用。结论 过表达miR-375可抑制四氢小檗碱对肠道组织损伤的保护作用，且促进了TLR4/NF-κB信号通路的激活，提示四氢小檗碱可能是通过抑制miR-375，进一步抑制TLR4/NF-κB通路的激活，从而保护肠道组织免受炎症损伤，且四氢小檗碱可有效改善肠道屏障作用，达到治疗坏死性小肠结肠炎的作用。

关键词

四氢小檗碱 / miR-375 / TLR4/NF-κB信号通路 / 坏死性小肠结肠炎

基金资助

内蒙古自治区卫生健康委医疗卫生科技项目（202201143）;内蒙古自治区卫生健康委首府地区公立医院高水平临床专科建设科技项目（2023SGGZ106）