基于TLR4/NF-κB/TNF-α信号通路探讨脱敏止嚏汤治疗过敏性鼻炎的机制研究

摘要

目的 探究脱敏止嚏汤治疗过敏性鼻炎的作用机制。方法 将人鼻腔上皮细胞系RPMI2650细胞分为6个组：对照组、LPS模型组、脱敏止嚏汤低剂量组、脱敏止嚏汤中剂量组、脱敏止嚏汤高剂量组和氯雷他定组，采用CCK-8法检测细胞活力并筛选合适的含药血清浓度用于后续实验。用筛选出的不同浓度含药血清对各组进行干预后，使用ELISA法、qRT-PCR法、Western Blot法检测通路相关炎症因子、mRNA、蛋白的表达，流式细胞仪检测细胞凋亡情况。结果 与对照组比较，模型组通路相关炎症因子、mRNA、蛋白表达均显著升高，细胞凋亡率显著升高，差异有统计学意义（P<0.05）；与LPS模型组比较，炎症因子表达情况：脱敏止嚏汤低剂量组IL-6、IL-8、TNF-α含量显著降低，差异有统计学意义（P<0.05）；脱敏止嚏汤中、高剂量组及氯雷他定组IL-6、IL-8、TNF-α、MUC5AC含量显著降低，差异有统计学意义（P<0.05）。凋亡情况：脱敏止嚏汤低、中、高剂量组及氯雷他定组细胞凋亡率显著降低，差异有统计学意义（P<0.05）。通路相关mRNA表达情况：脱敏止嚏汤低剂量组IL-6、IL-8、NF-κB P65、TNF-α、MUC5AC、TLR4 m RNA表达显著降低，差异有统计学意义（P<0.05）；脱敏止嚏汤中高剂量组IL-6、IL-8、NF-κB P65、TNF-α、MUC5AC、TLR4 mRNA表达均显著降低，差异有统计学意义（P<0.05）；氯雷他定组IL-6、IL-8、MUC5AC、TLR4、NF-κB P65、TNF-α mRNA表达均显著降低，差异有统计学意义（P<0.05）。通路相关蛋白表达情况：脱敏止嚏汤低、中剂量组TLR4、MyD88、NF-κB P-p65、TNF-α蛋白表达降低，差异没有统计学意义（P >0.05）；脱敏止嚏汤高剂量组及氯雷他定组MyD88、NF-κB P-p65、TNF-α蛋白表达显著降低，差异有统计学意义（P<0.05）。结论 脱敏止嚏汤可能通过调控TLR4/NF-κB/TNF-α信号通路发挥治疗AR的作用。

关键词

脱敏止嚏汤 / 过敏性鼻炎 / 含药血清 / TLR4/NF-κB/TNF-α信号通路