LncRNA CCAT1通过TGF-β1/smad信号通路对大肠癌细胞增殖和侵袭的研究

葛永利; 聂婷婷; 齐晓艳

doi:10.16343/j.cnki.issn.2095-512x.20260116.001

内蒙古医科大学学报 ›› 2026, Vol. 48 ›› Issue (01) : 33 -38. DOI: 10.16343/j.cnki.issn.2095-512x.20260116.001

LncRNA CCAT1通过TGF-β1/smad信号通路对大肠癌细胞增殖和侵袭的研究

葛永利, 聂婷婷, 齐晓艳

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摘要

目的检测长链非编码RNA CCAT1(long non-coding RNA CCATi,lncRNA CCAT1)对结直肠癌细胞增殖、侵袭、迁移和凋亡以及转化生长因子-β1/smad信号通路的影响，探讨LncRNA CCAT1通过TGF-β1/smad信号通路对大肠癌细胞的增殖和侵袭的作用及可能机制。方法（1）RT-qPCR法检测LncRNA CCAT1在大肠癌细胞与正常大肠细胞中的表达情况。（2）分别使用MTT法、Transwell法、流式细胞术检测si-CCAT1组及NC组细胞的增殖、迁移、侵袭、凋亡情况，以蛋白质免疫印迹技术定量分析实验组与对照组细胞中关键信号分子的表达差异。（3）在结肠癌细胞株HCT116中加入TGF-β1/smad信号通路抑制剂（Asiaticoside），对照组加入同等体积的DMSO，分别使用MTT法、Transwell法、流式细胞术研究两组细胞的增殖、迁移、侵袭、凋亡情况。（4）构建抑制剂+si-CCAT1组（转染CCAT1-siRNA）、DMSO+si-CCAT1组（转染CCAT1-siRNA）、抑制剂+NC组及DMSO+NC组，使用MTT法、Transwell法、流式细胞术研究各组细胞的增殖、侵袭、迁移、凋亡情况，使用Western Blot法检测各组细胞中TGF-β1、smad2/3、p-smad2/3、PCNA、E-cadherin和snail蛋白表达水平。结果（1）沉默人结肠癌细胞株HCT116中的LncRNA CCAT1后，结肠癌细胞的增殖、迁移、侵袭均受到了明显抑制，癌细胞的凋亡较前显著增多。（2）用TGF-β1/smad信号通路抑制剂处理结肠癌细胞株HCT116后，结肠癌细胞的增殖、迁移、侵袭均受到了明显抑制，癌细胞的凋亡较前显著增多。（3）对TGF-β1/smad信号通路进行抑制剂预处理后，同时沉默LncRNA CCAT1，通过对各组细胞的增殖、侵袭、迁移、凋亡及WB蛋白表达结果进行比较分析，实验结果与仅沉默CCAT1组、仅抑制TGF-β1/smad信号通路组及阴性对照组比较：(1)细胞的增殖、侵袭和迁移受到明显抑制；(2)细胞的凋亡明显增多；(3)TGF-β1/smad信号通路的各个正相关信号分子的蛋白表达绝大多数受到明显的抑制作用，表达量明显减少，负相关信号分子E-cadherin蛋白表达明显增加。结论（1）LncRNA CCAT1在人结肠癌细胞中表达明显增高，与疾病进展及预后相关。（2）沉默LncRNA CCAT1可以通过抑制TGF-β1/smad信号通路从而抑制大肠癌细胞的增殖、迁移和侵袭，并增加大肠癌细胞的凋亡。