微流控芯片联合免疫磁珠分选技术捕获肝癌循环肿瘤细胞的方法建立与评价

摘要

目的 采用微流控芯片联合免疫磁珠分选技术（magnetic-activated cell separation,MACS），建立肝癌循环肿瘤细胞（hepatocellular carcinoma circulating tumor cell,HCC CTC）捕获新方法，并初步验证其捕获效果。方法基于确定性定向偏移（deterministic lateral displacement,DLD）原理制造微流控芯片，并将其与成熟MACS分选模块整合构建HCC CTC捕获平台，以正常健康志愿者血样掺入肝癌-绿色荧光细胞（HepG-2-GFP）模拟HCC CTC，在最佳进样速度条件下检验该方法对模拟HCC CTC的捕获效果。结果 当缓冲液进液速度100μL/min、样本进液速度60μL/min时为最佳进样速度；在对不同样本浓度模拟HCC CTC捕获实验中，该法平均回收率>85%；背景细胞去除率白细胞为（99.3±1.6）%、红细胞为（99.6±0.8）%、血小板为（99.9±1.2）%;HCC CTC相对背景红细胞富集851倍、白细胞56倍、血小板1 715倍。结论 微流控芯片联合MACS对HCC CTC具有较高捕获率，为下一步临床应用及研究提供价值。

关键词

微流控芯片 / 肝癌循环肿瘤细胞 / 免疫磁珠分选技术