Neuritin通过cGAS-STING通路调节自噬改善白蛋白结合型紫杉醇诱导的神经病理性疼痛

摘要

目的 本文旨在探究神经修复蛋白（Neuritin）通过调节自噬对纳米白蛋白结合型紫杉醇（albumin-bound paclitaxel,Nab-PTX）所致外周神经损伤中的作用，并探究环磷酸鸟苷-腺苷酸合成酶（cyclic GMP-AMP synthase,c GAS）-干扰素基因刺激因子（stimulator of interferon gene,STING）通路是否介导了Neuritin对化疗后神经病理性疼痛（chemotherapy-induced peripheral neuropathy,CIPNP）的改善。方法 选取健康雄性Sprague-Dawley(SD)大鼠90只，随机分为6组（每组5只）：对照组（Control）、白蛋白结合型紫杉醇组（Nab-PTX）、白蛋白结合型紫杉醇+神经修复蛋白组（Nab-PTX+Neuritin）、白蛋白结合型紫杉醇+自噬抑制剂组（Nab-PTX+3-MA）、白蛋白结合型紫杉醇+自噬激动剂组（Nab-PTX+Rap）、白蛋白结合型紫杉醇+神经修复蛋白+自噬抑制剂组（Nab-PTX+Neuritin+3-MA）。所有实验均重复进行3次。检测大鼠机械缩足反射阈值（mechanical withdrawal threshold,MWT）及热缩足反射潜伏期（thermal withdrawal latency,TWL）。酶联免疫吸附试验（enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA）法检测脊髓组织中炎性细胞因子肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor alpha,TNF-α)、白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)的表达；蛋白质印迹法（Western Blot）检测自噬相关蛋白LC3Ⅱ、LC3Ⅰ、P62、和cGAS-STING通路相关蛋白c GAS、STING、P-STING的表达。结果 与Control组相比，Nab-PTX组MWT和TWL阈值下降，差异有统计学意义（P<0.05），证明Nab-PTX会引起大鼠神经病理性疼痛；与Nab-PTX组相比，Nab-PTX+Neuritin组MWT和TWL阈值升高，差异有统计学意义（P<0.05），表明Neuritin可缓解Nab-PTX引起的神经病理性疼痛；与Control组相比，Nab-PTX组炎症相关因子TNF-α、IL-6表达升高，差异有统计学意义（P<0.05）,LC3-Ⅱ、LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ表达降低（P<0.05）,P62表达升高，差异有统计学意义（P<0.05），表明Nab-PTX可诱导炎症产生，抑制自噬相关蛋白表达；与Control组相比，Nab-PTX组cGAS，差异有统计学意义（P<0.05）p-STING，差异有统计学意义（P<0.05）蛋白含量升高，表明Nab-PTX导致c GAS-STING通路激活；与Nab-PTX组相比，Nab-PTX+Neuritin组LC3-Ⅱ、LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ升高，差异有统计学意义（P<0.05）,P62下降，差异有统计学意义（P<0.05），表明Neuritin可促进自噬相关蛋白表达；与Nab-PTX组相比，Nab-PTX+Neuritin组cGAS下降，差异有统计学意义（P<0.05）、p-STING下降，差异有统计学意义（P<0.05），表明Neuritin可抑制cGAS-STING通路表达。结论 Neuritin可能通过调节cGAS-STING通路表达激活自噬，减少炎症因子释放，缓解Nab-PTX引起的神经病理性疼痛。

关键词

神经修复蛋白 / 自噬 / 白蛋白结合型紫杉醇 / 神经病理性疼痛 / 环磷酸鸟苷-腺苷合成酶-干扰素基因刺激蛋白信号通路

基金资助

内蒙古自治区自然科学基金项目(2024LHMS08033); 内蒙古医科大学附属医院重点实验室开放基金项目(2022NYFYSYS003); 内蒙古医科大学联合项目(YKD2023LHO54);内蒙古医科大学联合项目(YKD2022LH021); 卫生健康促进项目(BJHA-CRP-009)