山柰酚通过改善肾小管上皮细胞的氧化应激与炎症反应减轻1型糖尿病小鼠肾损伤

摘要

背景 糖尿病肾病是糖尿病最严重的并发症之一，长期高血糖会导致全身性的氧化应激和低度炎症状态。山柰酚是一种天然的黄酮类化合物，具有出众的抗炎和抗氧化的能力，可能会对糖尿病肾病的治疗有一定作用。目的 研究山柰酚对糖尿病肾病小鼠肾损伤的治疗作用及其机制。方法 18只6～8周龄FVB小鼠随机分为对照组、糖尿病模型组和山柰酚灌胃组，每组6只，并通过对模型组和山柰酚组腹腔注射链脲佐菌素构建1型糖尿病小鼠模型。模型建立后，治疗组灌胃山柰酚[70 mg/(kg·d)]，对照组与模型组灌胃等量对照溶剂CMC-Na,16周后处死小鼠。病理染色观察小鼠肾病理损伤；qPCR和Western blot检测小鼠肾组织内炎症因子mRNA和氧化应激相关蛋白的表达；通过流式细胞术检测小鼠肾内巨噬细胞的数量和种类。体外建立高糖诱导肾小管上皮细胞(HK2)损伤模型，使用CCK-8试剂盒检测不同浓度山柰酚对HK2的活性影响，检测肾小管上皮细胞活性氧生成；qPCR和Western blot检测HK2内炎症因子mRNA和氧化应激相关蛋白以及炎症激活通路蛋白p38的表达。结果 动物实验结果显示，与糖尿病模型组相比，经过灌胃山柰酚治疗后，肾病理损伤得到改善，肾小球系膜增生减少，足突融合减少；肾组织内白细胞介素(interleukin,IL)-1β、IL-6、肿瘤坏死因子α等炎症因子转录水平降低(P<0.01);NADPH氧化酶4表达降低(P<0.01)；肾内炎性巨噬细胞数量减少，肾炎症微环境得到改善。细胞实验结果显示，山柰酚能够抑制高糖诱导下HK2的活性氧产生，改善氧化应激相关蛋白酶的表达(P<0.05)；降低相关炎症因子mRNA的表达(P<0.01)，且降低了p38的磷酸化(P<0.05)。结论 山柰酚可能通过HO-1/p38通路减轻糖尿病肾小管上皮细胞炎症因子的分泌，增加相关氧化还原酶的表达，进而减轻糖尿病导致的肾损伤，保护肾功能。

关键词

山柰酚 / 肾小管上皮细胞 / 氧化应激 / 炎症 / HO-1/p38通路 / 糖尿病肾病

基金资助

国家自然科学基金项目(32141005)