长波紫外线照射小鼠角膜构建Fuchs角膜内皮营养不良疾病模型的可行性研究

摘要

背景 Fuchs角膜内皮营养不良(Fuchs endothelial corneal dystrophy,FECD)是一种常见的角膜内皮疾病，其具体发病机制尚不明确，临床治疗效果不佳。目的 研究长波紫外线(ultraviolet A,UVA)照射小鼠角膜构建迟发型FECD动物模型的可靠性和稳定性。方法 取雌性和雄性小鼠各36只，使用波长为365 nm的紫外光照射小鼠右眼角膜作为UVA组，左眼不做处理作为对照组。于建模后1周、2周、4周进行观察并采集样本，分别采用免疫荧光染色、苏木精-伊红(hematoxylin-eosin,HE)染色和透射电子显微镜进行观察，每组4个样本。裂隙灯显微镜观察角膜透明度、前节OCT观察角膜厚度、活体共聚焦显微镜观察角膜内皮细胞数量及形态。结果 裂隙灯照相及前节OCT显示UVA组较对照组小鼠角膜水肿混浊、增厚(P<0.05)；活体共聚焦显微镜结果 显示小鼠角膜内皮细胞扩大变形伴数量减少(P<0.05)，此外在第4周时观察到赘生物“Guttae”的形成，这是FECD的显著病理特征之一；免疫荧光染色(ZO-1/DAPI)结果 显示小鼠角膜内皮细胞扩大变形且胞间紧密连接程度下降，DAPI染色细胞核计数下降(P<0.05);HE染色可见UVA照射后小鼠角膜基质胶原纤维疏松水肿伴间隙增大、角膜增厚，内皮细胞受损；透射电子显微镜显示UVA组小鼠角膜内皮细胞中线粒体结构遭到破坏，后弹力层较对照组显著增厚(P<0.05)。结论 本研究证实了UVA照射小鼠角膜诱导迟发型FECD动物模型的可行性；该模型呈现的角膜后弹力层增厚和内皮细胞损伤等特征与FECD病理特征相吻合。

关键词

Fuch角膜内皮营养不良 / 紫外线 / 动物模型 / 角膜后弹力层 / 角膜内皮细胞丧失