过表达肝细胞生长因子的人牙髓来源间充质干细胞通过调节Th2/Th1、Th17/Treg平衡改善变应性鼻炎的研究

摘要

背景当前间充质干细胞治疗变应性鼻炎研究较多，过表达肝细胞生长因子的间充质干细胞在其中的作用和机制有待进一步探究。目的 构建过表达肝细胞生长因子的人牙髓来源间充质干细胞(hepatocyte growth factor-overexpressing human dental pulp-stem cells,HGF/hDPSCs)，研究其对变应性鼻炎的作用和可能机制。方法 提取人牙髓来源间充质干细胞，利用腺病毒载体Ad5将靶基因HGF转入，以构建HGF/hDPSCs，并评估其HGF分泌能力和鼻黏膜分布。采取卵清蛋白腹腔注射致敏、滴鼻激发的方式构建变应性鼻炎小鼠模型。根据致敏、激发和干预措施的区别，将小鼠分为4组：WT-PBS组(阴性对照组)，AR-PBS组(阳性对照组)，AR-hDPSCs组(hDPSCs治疗组)，AR-HGF/hDPSCs组(HGF/hDPSCs治疗组)。利用症状评分、病理学分析(HE、PAS染色)监测各组小鼠变应性鼻炎症状和鼻黏膜局部炎症情况。采取免疫组织化学染色(CD3、CD19)、ELISA(总IgE、OVA特异IgE)和PCR(IFN-γ、IL-5、IL-13、IL-17A、Foxp3)探究免疫应答机制。结果 HGF/hDPSCs可在体外和体内稳定表达HGF，经尾静脉注射后可迁移至小鼠鼻黏膜。症状评分显示，HGF/hDPSCs可改善变应性鼻炎小鼠挠鼻、喷嚏、流涕等过敏症状(P<0.05)。病理分析和免疫组化结果显示，变应性鼻炎小鼠鼻黏膜免疫反应以T淋巴细胞聚集为主要特征。应用HGF/hDPSCs可减少鼻黏膜淋巴细胞浸润和杯状细胞增生等鼻黏膜炎症表现，并降低病理损伤评分(P<0.01)。ELISA结果表明，HGF/hDPSCs可下调血清总IgE和OVA特异性IgE表达水平(P<0.01)。PCR结果表明，HGF/hDPSCs可抑制变应性鼻炎小鼠脾Th1细胞(IFN-γ)、Th2细胞(IL-5、IL-13)应答水平，改变了Th2/Th1平衡；下调Th17细胞(IL-17A)应答水平(P<0.05)，不影响Treg细胞(Foxp3)应答水平(P>0.05)，改变了Th17/Treg平衡。结论 HGF/hDPSCs可通过调节Th2/Th1、Th17/Treg平衡缓解变应性鼻炎小鼠的鼻部过敏症状，减轻鼻黏膜炎症。

关键词

变应性鼻炎 / 间充质干细胞 / 肝细胞生长因子 / CD4⁺T细胞 / 细胞因子