蛙皮素受体亚型-3在宫颈癌细胞能量代谢中的作用及机制探讨

摘要

背景 宫颈癌是女性常见的恶性肿瘤，发病率在我国女性恶性肿瘤中居第2位。目的 探讨蛙皮素受体亚型-3(bombesin receptor subtype-3,BRS-3)在宫颈癌细胞能量代谢中的作用及机制。方法 选取2021年6月—2023年12月在新疆维吾尔自治区中医医院妇科门诊或住院的19例18～60岁病理组织学确诊为宫颈癌的患者作为宫颈癌组，同期门诊或住院的18～60岁病理组织学确诊为良性病变的患者作为良性组。获得两组患者的宫颈组织标本。实时荧光定量PCR技术(quantitative real-time polymerase chain reaction,qRT-PCR)和免疫组化法检测人良性宫颈组织和人宫颈癌组织中蛋白表达水平以及BRS-3、GSK3β、PRS6KB基因表达水平。培养人宫颈癌细胞系Hela细胞，过表达或敲除BRS-3基因，Hela细胞随机分为空白对照组、空载对照组、BRS-3过表达组、阴性对照组和BRS-3沉默组，CCK-8检测Hela细胞增殖情况，检测Hela细胞乳酸、ATP、谷氨酸含量，qRT-PCR和Western blot检测BRS-3、GSK3β、RPS6KB1、PI3K、AKT的mRNA和蛋白表达水平。结果 与人良性病变宫颈组织相比，人宫颈癌组织BRS-3的m RNA和蛋白表达水平均升高(P<0.05),GSK3β、PRS6KB的mRNA表达水平升高(P<0.05)。培养Hela细胞，CCK-8检测结果显示，BRS-3过表达组Hela细胞存活率高于空白对照组和空载对照组(P<0.05);BRS-3沉默组Hela细胞存活率低于空白对照组、空载对照组、阴性对照组和BRS-3过表达组(P<0.05)。BRS-3过表达组Hela细胞中乳酸、ATP、谷氨酸含量高于空白对照组和空载对照组；BRS-3沉默组Hela细胞中乳酸、ATP、谷氨酸含量低于空白对照组、空载对照组、阴性对照组和BRS-3过表达组(P<0.05)。qRT-PCR检测结果显示，BRS-3沉默组中GSK3β、RPS6KB1、PI3K、AKT的mRNA表达水平均低于空白对照组和阴性对照组(P<0.05)。Western blot结果显示，BRS-3沉默组BRS-3、GSK3β、RPS6KB1、PI3K、AKT蛋白表达水平以及p-AKT蛋白的磷酸化水平均低于空白对照组和阴性对照组(P<0.05)。结论 BRS-3在宫颈癌组织中表达升高，BRS-3可能通过增加Hela细胞有氧糖酵解促进肿瘤细胞增殖。

关键词

蛙皮素受体亚型-3 / 宫颈癌 / 能量代谢 / 糖酵解 / 细胞增殖

基金资助

新疆维吾尔自治区自然科学基金项目(2021D01C236)