Slit引导配体2通过调控AMPK/SIRT1-FoxO1信号通路影响糖尿病小鼠视网膜血管损伤的机制研究

摘要

目的 探讨Slit引导配体2(SLIT2)是否通过调控腺苷单磷酸活化蛋白激酶(AMPK)/转录沉默信息调节因子1(SIRT1)-叉头盒蛋白O1(FoxO1)信号通路通过对糖尿病小鼠视网膜血管损伤的影响。方法 30只db/db小鼠随机分为DR组(db/db小鼠)、DR+阴性对照载体组(DR+sh-NC组)和DR+sh-SLIT2组，每组10只。另选10只db/m小鼠为对照组。DR+sh-NC组和DR+sh-SLIT2组麻醉后分别在双眼玻璃体腔内注射sh-SLIT2的腺相关病毒(AAV)载体。眼底荧光血管造影(FFA)和苏木精伊红染色观察视网膜血管病变；酶联免疫吸附测定检测血清白细胞介素-6(IL-6)，肿瘤坏死因子α(TNF-α)和血管内皮生长因子(VEGF)的水平，荧光定量PCR检测SLIT2 mRNA表达；Western blot检测视网膜组织SLIT2、AMPK、SIRT1、FoxO1蛋白水平。结果 与对照组相比，DR组、DR+sh-NC组、DR+sh-SLIT2组血糖、每日饮水量、每日排尿量、食物摄入量及体质量均明显升高(P<0.05)；与对照组相比，DR组视网膜存在血管病变及病理损伤，SLIT2 mRNA及蛋白表达、IL-6、TNF-α和VEGF水平，FoxO1蛋白水平均明显升高(P<0.05)，AMPK、SIRT1蛋白水平均明显降低(P<0.05)；与DR+sh-NC组相比，DR+sh-SLIT2组的视网膜血管病变及病理损伤明显减轻，SLIT2 mRNA及蛋白表达、IL-6、TNF-α和VEGF水平，FoxO1蛋白水平均明显降低(P<0.05)，AMPK、SIRT1蛋白水平均明显升高(P<0.05)。结论 沉默SLIT2表达显著改善糖尿病小鼠视网膜血管损伤及炎症水平，这可能是通过调控AMPK/SIRT1-FoxO1信号通路发挥作用的。

关键词

Slit引导配体2 / 腺苷单磷酸活化蛋白激酶 / 转录沉默信息调节因子1 / 叉头盒蛋白O1 / 糖尿病视网膜病变

基金资助

河北省2022年度医学科技研究课题(20220293)