基于Th17/Treg轴探讨健脾养肝汤治疗自身免疫性肝炎的分子机制

摘要

目的 基于Th17/Treg轴探讨健脾养肝汤治疗自身免疫性肝炎分子机制。方法 将Balb/c小鼠随机分为对照组、模型组、泼尼松龙组、健脾养肝汤组。造模方法采用尾静脉注射刀豆蛋白A(Con A)，每周1次，连续6周。同时分别给予相应药物灌胃治疗，每日1次，连续6周。电镜扫描下观察各组肝脏组织超微结构差异。流式细胞术检测脾脏和外周血Th17、Treg细胞亚群比例，流式荧光法检测血浆内炎性细胞因子(IL-2、IL-6、IL-17A、TNF-α、IL-4、IL-10)水平，免疫组化法检测肝脏组织转录因子ROR γt、Foxp3表达。结果 电镜观察，对照组肝细胞索和肝窦结构清晰，肝窦内皮细胞表面光滑，其上窗孔网均匀分布。模型组小鼠肝细胞索和肝窦结构及窗孔网模糊紊乱，泼尼松龙组与健脾养肝汤组肝窦和窗孔网结构相对清晰。脾脏和外周血Th17、Treg细胞，与对照组比较，模型组脾脏、外周血Th17细胞均明显升高，外周血Treg细胞明显降低(P<0.05)，脾脏Th17/Treg细胞比值明显上升(P<0.01)；与模型组比较，泼尼松龙组与健脾养肝汤组脾脏Th17细胞、Th17/Treg细胞比值均明显降低(P<0.01)。血浆炎性细胞因子比较，与对照组比较，模型组IL-17水平明显升高(P<0.05)，IL-10明显降低(P<0.05)；与模型组比较，健脾养肝汤组IL-17明显降低(P<0.05)。免疫组化结果：与对照组相比，模型组RORγt表达增加；与模型组比较，泼尼松龙组与健脾养肝汤药物组的RORγt表达减少。结论 健脾养肝汤可能通过调控转录因子RORγt、Foxp3表达，调节Th17/Treg轴平衡，降低炎症因子表达，进而改善肝窦结构和肝窦内皮细胞免疫微环境，减轻肝脏炎症损伤。

关键词

健脾养肝汤 / 自身免疫性肝炎 / Th17/Treg轴 / 肝脏免疫微环境

基金资助

国家重点研发计划项目(2018YFC1705700); 中国中医科学院科技创新工程重大攻关项目(CI2021A00809)