基于Wnt/β-catenin信号通路探讨桃红四物汤促进骨髓间充质干细胞增殖与成骨分化的机制研究

摘要

目的 探讨桃红四物汤(THSWD)含药血清通过Wnt/β-catenin信号通路对大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)增殖与成骨分化的影响。方法 体外培养大鼠BMSCs,采用不同浓度THSWD含药血清(2.5%、5%、10%、15%、20%、30%)干预BMSCs,以CCK-8法筛选THSWD含药血清最佳作用浓度。分别设置空白组、模型组、THSWD组以及阳性对照组,观察大鼠BMSCs成骨分化情况,通过碱性磷酸酶(ALP)染色和茜素红(ARS)染色检测骨向分化程度;通过RT-qPCR和Western blot法检测各组细胞成骨关键因子及Wnt/β-catenin通路关键蛋白表达。结果THSWD含药血清可显著提高BMSCs存活率,在10%浓度、作用48 h时效果最显著。ALP、ARS结果显示,THSWD组BMSCs成骨分化能力及钙盐沉积程度高于模型组(P<0.001)。RT-qPCR和Westernblot分析显示,THSWD组Runx2、OCN、Col-1、Wnt1、Wnt3a和β-catenin的mRNA和蛋白表达水平显著高于模型组(P<0.05)。结论 THSWD可促进BMSCs的增殖与成骨分化,其机制可能与激活Wnt/β-catenin信号通路有关。

关键词

桃红四物汤 / 骨髓间充质干细胞 / 成骨分化 / Wnt/β-catenin信号通路