鹅掌楸苷对缺血再灌注大鼠心功能的保护作用与机制

摘要

目的：有关鹅掌楸苷对于缺血再灌注(ischemia/reperfusion,I/R)后心肌细胞是否具有保护作用及其作用机制的研究较少。本研究拟探讨鹅掌楸苷对I/R大鼠心功能的保护作用及其可能的机制。方法：将大鼠随机分为假手术组、I/R组、鹅掌楸苷+I/R组和丹参滴丸+I/R组。鹅掌楸苷+I/R组及丹参滴丸+I/R组于术前5 d至术后3 d，每日予以鹅掌楸苷溶液灌胃1次，I/R组及假手术组采用每日10 mL/kg生理盐水灌胃。术后分别对假手术组、I/R组和鹅掌楸苷+I/R组动物进行超敏肌钙蛋白定量检测。术后3 d应用超声心动图对大鼠心功能进行检测。处死大鼠后行苏木精-伊红(hematoxylin-eosin,HE)染色和免疫组织化学(immunohistochemistry,IHC)染色。进一步应用酶联免疫吸附试验(enzymelinkedimmunosorbentassay, ELISA)对组织行白介素(interleukin, IL)-1β、肿瘤坏死因子α(tumornecrosis factor-alpha, TNF-α)、 IL-6、单核细胞趋化蛋白-1(monocytechemoattractantprotein-1, MCP-1)、活性氧(reactive oxygen species,ROS)和乳酸脱氢酶A(lactate dehydrogenase A,LDHA)进行检测。应用蛋白质印迹法检测组织的炎症通路及凋亡相关蛋白的表达。4组大鼠均采用real-time PCR检测相关基因分子的相对mRNA表达。结果：与I/R组比较，术后2 h鹅掌楸苷+I/R组肌钙蛋白显著降低(P<0.05)。心脏超声显示：与I/R组比较，鹅掌楸苷+I/R组的心功能显著好转，病理学染色显示I/R组的心肌组织破坏严重，大量炎症细胞浸润。ELISA结果显示：与I/R组比较，鹅掌楸苷+I/R组的IL-1β、TNF-α、IL-6、MCP-1、ROS和LDHA含量均降低(均P<0.05)。与I/R组比较，鹅掌楸苷+I/R组炎症及凋亡相关蛋白表达均降低(均P<0.05)。与假手术组比较，I/R组、鹅掌楸苷+I/R组和丹参滴丸+I/R组B-淋巴细胞瘤-2基因(B-cell lymphoma-2,BCL-2)的mRNA相对表达量显著降低(均P<0.05)；与I/R组比较，鹅掌楸苷+I/R组BCL-2mRNA相对表达量显著升高(P<0.05)。与假手术组比较，I/R组BCL-2-相关X蛋白质(BCL-2 associated X protein,Bax)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶(caspase,Cas)3、Cas9、κB抑制蛋白激酶(inhibitor ofκB kinase,IKK)α、IKKβ、核因子-κB(nuclear factor kappa B,NF-κB)、P65、P50、胞内磷脂酰肌醇3激酶(phosphatidylinositol 3-kinase,PI3K)、蛋白激酶B(protein kinase B,Akt)的mRNA相对表达量均显著升高(均P<0.05)，鹅掌楸苷+I/R组和丹参滴丸+I/R组上述基因的mRNA相对表达量显著降低(均P<0.05)；且鹅掌楸苷+I/R组显著低于I/R组(均P<0.05)。结论：鹅掌楸苷可能通过抑制局部炎症反应和细胞凋亡，进而对大鼠缺血再灌注后心功能起保护作用。

关键词

冠心病 / 缺血再灌注 / 鹅掌楸苷 / 细胞凋亡 / 炎症因子 / 炎症通路