石蜡包埋组织样本中人乳头瘤病毒的检测方法

摘要

目的：人乳头瘤病毒(human papillomavirus,HPV)与多种疾病的发生、发展相关，明确HPV的感染状态对多种疾病的诊治具有重要意义。本研究选取宫颈细胞学HPV检测阳性患者的活检标本，探索石蜡包埋组织样本中HPV的检测方法。方法：选取宜昌市中心人民医院病理科2024年1月至2024年12月宫颈细胞学HPV检测阳性患者同一时间行宫颈活检的石蜡包埋组织样本30例，其免疫组织化学指标细胞周期蛋白依赖性激酶抑制剂2A(cyclin-dependent kinase inhibitor 2A,CDKN2A，又称p16蛋白)检测均为阳性。通过对比不同检测方法(流式荧光法和杂交芯片法)、不同DNA提取方法(磁珠法和柱提法)、不同数量组织样本(6μm的石蜡切片6张、8张、10张及12张)的检测结果，以确定石蜡包埋组织样本中HPV检测的最优方法。结果：使用6μm的石蜡切片8张，采用柱提法提取石蜡组织样本的DNA经PCR扩增后，采用流式荧光法对石蜡组织样本中的HPV进行检测、分型的敏感度及内控合格率最高[内控合格率为90%(27/30)，检测敏感度为87%(26/30)]。结论：本研究建立的石蜡包埋组织样本中HPV检测的方法具有操作简便、可具体分型的特点，且结果客观、无需人工判读。该方法检测准确性高、稳定性好，可广泛应用于HPV相关疾病的病理诊断与分子分型，可为临床治疗策略的制订及预后判断提供可靠依据，具备显著的临床应用价值。

关键词

石蜡包埋组织 / 人乳头瘤病毒 / 检测方法 / DNA提取方法 / 样本数量