对辣椒素通过MAP1S介导自噬减缓大鼠硬膜外纤维化的效果观察

摘要

目的 探究局部应用辣椒素（Cap）对大鼠椎板切除术后硬膜外纤维化（EF）的效果。方法 选取48只8周龄、体重260～320 g的雄性SD大鼠，随机分为假手术组、生理盐水对照组和辣椒素处理组（5 mg/ml和10 mg/ml）。对生理盐水对照组，辣椒素处理组大鼠行椎板切除术。假手术组仅暴露硬脊膜，不行椎板切除术。术前术后通过Basso-Beattie-Bresnahan(BBB)运动评分评估大鼠的关节活动、躯干运动及协调情况。术后1个月，通过大体观察、HE染色、免疫组织化（IHC）、Masson染色和天狼猩红染色评估EF程度。运用串联质谱标签（TMT）蛋白定量组学技术、qRT-PCR和组织免疫荧光染色检测微管相关蛋白1S(MAP1S)、自噬相关蛋白（ATG9A）、纤维连接蛋白（FN1）、肌动蛋白（ACTA2）、微管相关蛋白1轻链3B(LC3B)等基因表达水平。结果 所有组别大鼠手术前后的BBB评分差异无统计学意义，表明手术和Cap无显著运动功能损害。宏观和组织学分析显示，Cap显著减缓了EF发生，抑制硬膜外细胞增殖，且效果与浓度相关。Masson和天狼猩红染色证实Cap减少了Ⅰ型胶原纤维沉积。TMT蛋白定量和qRTPCR分析揭示，Cap上调了MAP1S和ATG9A表达，下调了FN1和ACTA2表达。免疫荧光染色显示，Cap处理后MAP1S和LC3B表达显著增加。结论 Cap通过激活MAP1S介导的自噬途径，有效抑制硬膜外区域细胞增殖和胶原纤维沉积，从而减缓EF进展。

关键词

局部应用 / 辣椒素 / 硬膜外纤维化 / 椎板切除术

基金资助

江苏省中医药科技发展计划项目（ZT202117）; 扬州市骨科学重点实验室（YZ2023249）