干预miR-206/MECOM/TGF-β/smad3轴对三阴性乳腺癌恶性进展的影响机制

摘要

目的 以三阴性乳腺癌细胞株231为研究对象，探讨干预miR-206/MECOM/TGF-β/smad3轴对三阴性乳腺癌恶性进展的影响及机制。方法 使用ualcan与Kaplan Meier Plotter在线分析MECOM、TGF-βR1、TGF-βR2、smad3、smad4、HDAC1、HDAC2及CTBP在乳腺癌组与正常乳腺组之间差异表达和与预后的关系。采用细胞共培养及共转染技术，在MDA-MB-231细胞中分别沉默转录因子MECOM、过表达和沉默miR-206,以及将二者共转染，采用RT-qPCR法检测TGF-βR1、TGF-βR2、smad3、smad4、HDAC1、HDAC2及CTBPmRNA表达水平；结果 ualcan在线分析在TCGA-BRCA中MECOM、TGF-βR2乳腺癌组低于正常乳腺组，差异有统计学意义(P<0.05);Kaplan Meier Plotter在线分析MECOM、TGF-βR1、TGF-βR2、smad3、smad4、HDAC1、HDAC2及CTBP差异表达与预后的关系。在TCGA数据库结果提示MECOM低表达较高表达患者中位生存期(overall survival, OS)长(P<0.05),smad3与smad4高表达较低表达患者OS长，差异有统计学意义(P<0.05),TGF-βR1、TGF-βR2、HDAC1、HDAC2及CTBP高表达与低表达患者OS差异无统计学意义(P>0.05)。单纯沉默MECOM后，与空白对照组相比，Si-MECOM组的TGF-βR2、HDAC1、HDAC2、smad3、smad4、CTBP mRNA表达水平降低(P<0.05);单纯干预miR-206后，MECOM、TGF-βR1、TGF-βR2、HDAC1、HDAC2、smad4、CTBP mRNA表达水平降低(P<0.05);共转染MECOM与miR-206后，与Si-MECOM组相比，siMECOM+inhibitor miR-206组的TGF-βR1、HDAC1、smad3、smad4mRNA表达水平降低，差异有统计学意义(P<0.05),TGF-βR2、HDAC2、CTBP mRNA表达水平升高，差异有统计学意义(P<0.05)。结论 miR-206对MECOM的调控可能是通过影响TGF-βR2、HDAC2、CTBPmRNA的表达来抑制TGF-β/SMAD通路活化阻止TNBC进展。

关键词

三阴性乳腺癌 / miR-206 / MECOM / 预后