海洋真菌Aspergillus sp. SWMU-WZ04-3的次生代谢产物及抗菌活性研究

Research on Secondary Metabolites from a Marine Fungus Aspergillus sp. SWMU-WZ04-3 and their Antibacterial Activities

摘要

目的 研究海洋真菌Aspergillus sp. SWMU-WZ04-3的次生代谢产物及抗菌活性。方法 利用硅胶、凝胶柱色谱、半制备高效液相色谱等现代色谱分析手段对菌株的次级代谢产物进行分离纯化,结合核磁共振波谱(nuclear magnetic resonance, NMR)、质谱(mass spectrometry, MS)及文献对比鉴定化合物单体结构,利用纸片扩散法测试其抗菌生物活性。结果 从Aspergillus sp. SWMU-WZ04-3的发酵产物中分离得到9个化合物:化合物1为3,4-dimethoxyacetophenone;化合物2为ethyl(2E)-3-(4-hydroxy-3-methoxyphenyl) prop-2-enoate;化合物3为4-methyl-5,6-dihydropyren-2-one;化合物4为3,15-dihydroxyl-(22E,24R)-ergosta-5,8(14),22-trien-7-one;化合物5为9,12-octadecadienoic acid (Z, Z)-2,3-dihydroxypropyl ester;化合物6为1'-Hexadecanoic acid-2',3'-dihydroxy-propyleste;化合物7为2-(4-Hydroxyphenyl)ethyl 2,2-dimethylpropanoate;化合物8为(22E, 24R)-麦角甾-5,7,22-三烯-3β-醇;化合物9为β-sitosterol。体外生物活性结果显示,化合物4在1 mg/mL的浓度下对大肠杆菌表现出抑制作用,其余化合物无明显抗菌活性。结论 化合物2、 5和6为首次从海洋真菌Aspergillus sp.中分离得到,且化合物4具有抗大肠杆菌活性,表明该菌株具有进一步研究的价值。

Abstract

Objective To study the secondary metabolites and their antibacterial activities from a marine-derived fungus Aspergillus sp. SWMU-WZ04-3. Methods The secondary metabolites from the fermented extracts of the fungus Aspergillus sp. SWMU-WZ04-3 were separated and purified by silica gel， gel column chromatography， semi-preparative high performance liquid chromatography and other modern chromatographic analysis methods. The structures of the compounds were identified by Nuclear Magnetic Resonance （NMR） analyses and Mass Spectrometry （MS） spectroscopic data， and by comparing with the data in previous literatures. Their antibacterial bioactivities were tested by disk diffusion method. Results Nine compounds were isolated from the fermentation broth of Aspergillus sp. SWMU-WZ04-3 and identified as 3，4-dimethoxyacetophenone （compound 1）， ethyl （2E）-3-（4-hydroxy-3-methoxyphenyl） prop-2-enoate （compound 2）， 4‐methyl‐5，6‐dihydropyren‐2‐one （compound 3）， 3，15-dihydroxyl-（22E，24R）-ergosta-5，8（14）， 22-trien-7-one （compound 4）， 9，12-octadecadienoic acid （Z， Z）-2，3-dihydroxypropyl ester （compound 5）， 1'-Hexadecanoic acid-2'，3'-dihydroxy-propylester （compound 6）， 2-（4-Hydroxyphenyl）ethyl 2，2-dimethylpropanoate （compound 7）， （22E， 24R）-stigmasta-5， 7， 22-trien-3-β-ol （compound 8）， β-sitosterol （compound 9）， respectively. In vitro biological activity results showed that compound 4 exhibited inhibitory effect against Escherichia coli at a concentration of 1 mg/mL， while other compounds had no obvious antibacterial activity. Conclusion Compounds 2， 5， 6 were isolated from Aspergillus sp. species for the first time， compound 4 has anti-Escherichia coli activity. The fungus Aspergillus sp. SWMU WZ04-3 has value in the further studys.

关键词

海洋真菌 / 曲霉菌属 / 次生代谢产物 / 化学成分 / 抗菌活性

Key words

Marine fungi / Aspergillus sp / Secondary metabolites / Chemical constituents / Antibacterial activity

海洋蕴含的生物量约占地球生物总量的80%，种类多达20多万种。其中，海洋真菌相较于其他微生物遗传背景复杂、代谢产物种类多、产量高，已成为海洋微生物新天然产物的主要来源^[1]。海洋真菌长期生活在极端生态环境（高压、局部高温、低营养、无光照和高盐）中，有着独特的生物代谢途径和防御系统，并在代谢过程中产生大量结构新颖且活性广泛的天然产物^[2-3]，加上其生长周期较短，不受季节等条件限制，因此海洋真菌具有巨大的新药研发潜能。

曲霉属（Aspergillus）于1729年被意大利生物学家皮耶尔·安东尼奥·米凯利首次记录。据不完全统计，曲霉属（毛霉菌科）有超过837种，如烟曲霉属、土曲霉属、黑曲霉属、黄曲霉属等^[4]。该属真菌在植物、土壤、海洋生物和海底沉积物等几乎所有需氧环境中都有其代表。曲霉属真菌的次级代谢产物非常丰富，包括生物碱类、聚酮类、萜类、多肽、甾醇等多种结构类型^{[1, 5-6]}。其中一些化合物显示出较好的抗菌、抗炎、杀虫、抗病毒及抗肿瘤等药理活性^{[3, 7-11]}，例如在Aspergillus. terreus真菌中发现的具有降脂作用的洛伐他汀^[12]；海洋曲霉属来源的二酮哌嗪类化合物Plinabulin目前已进入Ⅲ期临床试验，该化合物具有良好的抗肿瘤作用，并可用来预防中心粒细胞减少症的发生^[13]；蛇孢菌素类化合物是一种二倍半萜类化合物，具有抗炎、杀线虫、抗肿瘤、抗病毒等多种重要的生物活性^[14-17]，其主要来源之一为曲霉属真菌^[18-19]。为了进一步挖掘海洋真菌中次生代谢产物及其应用价值，本研究以一株海绵来源的曲霉属真菌Aspergillus sp. SWMU-WZ04-3为研究对象，通过半制备色谱以及各种填料的柱色谱等现代色谱分析手段对其次生代谢产物进行分离纯化，结合核磁共振等技术鉴定出9个单体化合物，并进一步测试其抗菌活性。

1 材料与方法

1.1 材料

菌株SWMU-WZ04-3保存于西南医科大学药学院菌株库，该菌株由广西科学院潘信利博士鉴定；大肠杆菌、金色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、白色念珠菌均来自西南医科大学药学院菌株库；左氧氟沙星药敏纸片、两性霉素B药敏纸片和空白药敏纸片购买于常德比克曼生物科技有限公司；大米和海盐购买于超市。琼脂粉、酵母膏、氯化钠、葡萄糖、蛋白胨均采购自北京奥博星生物技术有限责任公司；甲醇、石油醚、无水乙醇、异丙醇、乙酸乙酯、二氯甲烷、丙酮等有机试剂均来自成都科隆化学品有限公司；氘代甲醇、氘代氯仿来自阿达玛斯试剂有限公司。

1.2 仪器

YXQ-LS-100 A立式压力蒸汽灭菌器（上海博迅医疗生物仪器股份有限公司）；N-1300旋转蒸发仪（上海艾朗仪器有限公司）；SW-CJ-2FD超净工作台（苏州安泰空气技术有限公司）；ME204E分析天平（Mettler-Toledo仪器有限公司）；赛谱锐思高效液相色谱仪（赛谱锐思科技有限公司）；Magnet System 400核磁共振仪（Bruker Corporation）; YMC-5 µm, ODS-A色谱柱（日本YMC有限公司）；Sephadex LH-20凝胶柱（GE）。

1.3 实验方法

1.3.1 菌株来源

菌株于2018年4月在中国广西涠洲岛采集，从海绵中分离并保存于本校药学院菌株库；对菌株的ITS区进行DNA扩增和测序，鉴定为Aspergillus sp. SWMU-WZ04-3，凭证样本 (No. SWMU-WZ04-3) 保存在西南医科大学药学院中药制剂教研室。

1.3.2 菌株发酵与提取

将海洋真菌活化，在培养箱中28 ℃恒温倒置培养3 d，将活化菌株接种到500 mL锥形瓶配制的真菌种子液培养基（麦芽浸膏1.5%，粗海盐1%）中，28 ℃，180 r振荡2 d后作为种子培养液。取种子培养液10 mL接种于已灭菌冷却后的大米培养基中扩大发酵，共100瓶，28 ℃下，静置发酵40 d，乙酸乙酯提取发酵产物，浓缩得到149.7 g粗提物。

1.3.3 分离纯化

将149.7 g乙酸乙酯粗提物用300 ~ 400目硅胶柱层析，石油醚/乙酸乙酯（50∶1 ~ 0∶1, v/v）洗脱，通过薄层色谱法，对TLC板进行分析，合并样品，最终得到了4个份（Fr.1 ~ Fr.4）。由于Fr.1和Fr.2分量较少，未能进一步进行分离。Fr.3和Fr.4的进一步分离纯化，具体分流流程见图1。

Fr.3进一步细分，500 ~ 800目硅胶层析，石油醚/丙酮（20∶1 ~ 0∶1, v/v）洗脱，合并得到6个亚流分（Fr.3.1 ~ Fr,3.6）。Fr.3.6用Sephadex LH-20纯化，甲醇作为洗脱剂，点板合并，选出目标样品，用反相色谱柱C₁₈分离（水∶甲醇 = 40∶60等度洗脱），于210 nm下检测，得到化合物1（3.3 mg）。流分Fr.3.4用Sephadex LH-20分离纯化，甲醇作为洗脱剂，点板合并，得到3个亚流分（Fr.3.4.1 ~ Fr.3.4.3）；流分Fr.3.4.2用反相色谱柱C₁₈分离（甲醇∶水 = 80∶20等度洗脱），210 nm下检测，得到化合物2（4.0 mg），化合物7（5.0 mg）。Fr.4继续分离纯化，500 ~ 800目硅胶柱层析，石油醚/乙酸乙酯（5∶1 ~ 0∶1, v/v） 洗脱，得到6个亚流分（Fr.4.1 ~ Fr.4.6）。Fr.4.4用500 ~ 800目的硅胶柱继续分离，洗脱系统为石油醚/乙酸乙酯（10∶1 ~ 0∶1, v/v），流分点板合并得到7个亚流分（Fr.4.4.1 ~ Fr.4.4.7）。

Fr.4.4.5继续用Sephadex LH-20分离纯化，甲醇作为洗脱剂，点板合并，得到7个亚流分（Fr.4.4.5.1 ~ Fr.4.4.5.7）。流分Fr.4.4.5.1用反相色谱柱C₁₈分离（水∶甲醇 = 30∶70等度洗脱），得到化合物3（38.0 mg）；流分Fr.4.4.5.2用反相色谱柱C₁₈分离（水∶甲醇 = 20∶80等度洗脱），得到化合物4（89.5 mg）；Fr.4.4.5.6用反相色谱柱C₁₈分离（水∶甲醇 = 40∶60等度洗脱），得到化合物5（8.0 mg）和化合物8（20.0 mg）。Fr.4.5用Sephadex LH-20分离纯化，甲醇作为洗脱剂，点板合并，得到6个亚流分（Fr.4.5.1 ~ Fr.4.5.6），流分Fr.4.5.1用制备板分离纯化，刮板条件为二氯甲烷∶丙酮 = 8∶1，得到化合物6（6.5 mg）和化合物9（15.0 mg）。

1.3.4 抗菌活性测试

从菌株SWMU-WZ04-3分离得到的单体化合物使用纸片扩散法测试抗菌活性，抑菌圈直径的大小用来表示抑菌效果是否显著^[20-21]。供试菌采用金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、大肠杆菌和白色念珠菌，其中白色念珠菌为致病真菌。将分离的单体化合物用甲醇配成1 mg/mL的溶液，把空白药敏纸片浸透药液并挥干溶剂，作为样品组；空白药敏纸片作为阴性对照；环丙沙星药敏纸片作为致病细菌阳性对照，两性霉素B药敏纸片作为致病真菌阳性对照；配制培养基，活化致病菌，将致病菌接种到培养基表面，放入药敏纸片，在37 ℃下倒置培养18 h，测量抑菌圈大小，并作好记录，每组平行3次。

2 结果

2.1 化合物结构鉴定

化合物1：白色晶体，¹H NMR（400 MHz, CDCl₃）δ: 7.58（1 H, dd, J = 8.3, 2.0 Hz, H-6），7.53（1 H, d, J = 2.0 Hz, H-2），6.89（1 H, d, J = 8.3 Hz, H-5），3.95（s, 3 H, 4-OCH₃），3.94（s, 3 H, 3-OCH₃），2.57（s, 3 H, -CH₃）；¹³C NMR（100 MHz, CDCl₃） δ: 196.8 （C=O），153.3（C-4），149.0（C-3）, 130.5（C-1），123.3（C-6），110.1（C-2），110.0（C-5），56.1（4-OCH₃），56.0（3-OCH₃），26.2（-CH₃）。对比化合物1的核磁数据与文献^[22]3,4-dihydroxyacetophenone基本一致，结合NMR谱图数据，分析得到文献中该化合物C-3,4位的-OH取代应为-OCH₃，所以化合物1确定为3,4-dimethoxyacetophenone。

化合物2：无色油状物，¹H NMR（400 MHz, CD₃OD）δ: 7.63（1 H, d, J = 15.9 Hz, H-3），7.21（1 H, d, J = 2.0 Hz, H-2'），7.10（1 H, dd, J = 8.2, 2.0 Hz, H-5'），6.84（1 H, d, J = 8.2 Hz, H-6'），6.38（1 H, d, J = 15.9 Hz, H-2），4.25（2 H, q, J = 7.1 Hz, H-1''），3.92（s, 3'-OCH₃），1.34（3 H, t, J = 7.1 Hz, H-2''）；¹³C NMR（100 MHz, CD₃OD）δ:167.9（C-1），149.20（C-3'），148.0（C-4'），145.2（C-3），126.3（C-1'），122.6（C-6'），115.1（C-5'），114.2（C-2），110.30（C-2'），60.0（C-1''），55.1（3'-OCH₃），13.2（C-2''）。对比文献^[23]，化合物2确定为：ethyl（2E）-3-（4-hydroxy-3-methoxyphenyl）prop-2-enoate。

化合物3：黄色油状物，¹H NMR（400 MHz, CD₃OD）δ: 5.77（1 H, m, H-2），2.44（2 H, t, J = 6.3 Hz, H-4），4.37（2 H, t, J = 6.3 Hz, H-5），2.02（3 H, s, -CH₃）；¹³C NMR（100 MHz, CD₃OD）δ: 167.5 （C-1），162.1 （C-3），116.5（C-2），29.9（C-4），67.6（C-5），23.0（C-7）。对比文献^[24]，与4‐methyl‐5,6‐dihydropyren‐2‐one数据一致，所以化合物3的结构鉴定为4‐methyl‐5,6‐dihydropyren‐2‐one。

化合物4：白色无定形粉末，¹H NMR（400 MHz, CD₃OD）δ: 1.80（2 H, m, H-1），1.91（2 H, m, H-2），3.66（1 H, m, H-3），2.56（2 H, m, H-4），5.87（1 H, m, H-6），2.35（1 H, m, H-9），1.81（2 H, m, H-11），1.61（2 H, m, H-12），4.09（1 H, m, H-15），1.61（2 H, m, H-16），1.32（1 H, m, H-17），0.97（3 H, s, H-18），0.89（3 H, s, H-19），2.03（1 H, m, H-20），1.08（3 H, m, H-21），5.34（1 H, m, H-22），5.27（1 H, m, H-23），1.60（1 H, m, H-24），1.28（1 H, m, H-25），0.85（3 H, s, H-26），0.85（3 H, s, H-27），1.07（3 H, t, J = 7.1 Hz, H-28）；¹³C NMR（100 MHz, CD₃OD）δ: 34.9（C-1），31.8（C-2），71.1（C-3），39.9（C-4），175.9（C-5），128.0（C-6），191.9（C-7），130.9（C-8），44.4（C-9），37.3（C-10），20.5（C-11），35.1（C-12），45.8（C-13），171.7（C-14），71.4（C-15），36.3（C-16），52.7（C-17），18.2（C-18），19.3（C-19），36.7（C-20），23.8（C-21），136.3（C-22），134.1（C-23），42.5（C-24），34.4（C-25），14.5（C-26），20.2（C-27），20.1（C-28）。通过查阅文献与核磁数据比对^[25]，其核磁数据与化合物 3β,15β-dihydroxy-（22E,24R）-ergosta-5,8（14）,22-trien-7-one基本一致，所以化合物4的结构鉴定为3β,15β-dihydroxy-（22E,24R）-ergosta-5,8（14）,22-trien-7-one。

化合物5：无色油状物，¹H NMR（400 MHz, CD₃OD）δ: 0.90（3 H, t, J = 6.7 Hz, H-18）, 1.18-1.40（16 H, s, H-4-7, H-14-17）, 1.61（2 H, t, J = 7.3 Hz, H-3），2.06（4 H, q, J = 6.8 Hz, H-8, 14），2.34（2 H, t, J = 7.3 Hz, H-2），2.77（2 H, t, J = 6.3 Hz, H-11），3.54（each 1H, m, H-3'），3.81（1 H, m, H-2'），4.09（each 1H, dd, J = 11.4, 6.2 Hz），5.28-5.39（4 H, m, H-9, 10, 12, 13）；¹³C NMR（100 MHz, CD₃OD）δ: 175.4（C-1）, 28.2（C-2），26.5（C-3），26.0（C-4），30.3（C-5），30.3（C-6），30.2（C-7），34.9（C-8），130.9（C-9），130.8（C-10），32.7（C-11），129.1（C-12），129.0（C-13），30.7（C-14），30.5（C-15），23.6（C-16），23.6（C-17），34.5（C-18），71.7（C-1'），66.4（C-2'），64.0（C-3'）。对比文献^[26]，化合物5的核磁数据与9,12-octadecadienoic acid（Z,Z）-2,3-dihydroxypropyl ester基本一致，所以化合物5结构确定为9,12-octadecadienoic acid（Z,Z）-2,3-dihydroxypropyl ester。

化合物6：白色粉末，¹H NMR （400 MHz, CDCl₃）δ: 0.88（3 H, t, J = 6.7 Hz, H-16），1.25（24 H, s, H4-15），1.63（2 H, t, J = 7.6 Hz, H-3），2.35（2 H, t, J = 7.6 Hz, H-2），3.56-3.79（2 H, m, H-3'），3.93（1 H, m, H-2'），4.13-4.24（1 H, dd, J = 6.2 Hz, 11.0 Hz, H-1'）；¹³C-NMR （100 MHz, CDCl₃）δ: 174.4（C-1），34.3（C-2），25.1（C-3），29.9-29.3（C4-14），22.9（C-15），14.3（C-16），65.3（C-1'），70.4（C-2'），63.5（C-3'）。对比文献^[26]，化合物6的核磁数据与1'-hexadecanoic acid-2',3'-dihydroxy-propylester基本一致，所以化合物6确定为1'-hexadecanoic acid-2',3'-dihydroxy-propylester。

化合物7：无色油状物，¹H NMR（400 MHz, CD₃OD）δ:^{7.05-7.01（2 H, d, H-3,5），6.73-6.69（2 H, d, H-2,6），4.19（2 H, t, J = 7.1 Hz, H-8），2.81（2 H, t, J = 7.1 Hz, H-9），1.99-1.92（9 H, H-11a,b,c）；13C NMR（101 MHz, CD₃OD）δ 171.5（C-9），155.7（C-1），129.5（C-4），128.5（C-3,5），114.8（C-2,6），65.2（C-8），33.8（C-10），22.5（C-7），19.4（C-11a,b,c）。对比文献[27]，化合物7的核磁数据与2-（4-Hydroxyphenyl）ethyl 2,2-dimethylpropanoate基本一致，所以化合物7确定为2-（4-Hydroxyphenyl）ethyl 2,2-dimethylpropanoate。}

化合物8：白色粉末，¹H-NMR（CD₃OD, 400 MHz）δ: 5.57（1 H, d, J = 5.9 Hz, H-6），5.38（1 H, d, J = 5.9 Hz, H-7）；5.20（2 H, t, J = 7.4 Hz, H-22, H-23）；0.83（3 H, d, J = 4.7 Hz, H-27），0.92（3 H, d, J = 4.7 Hz, H-26），0.94（3 H, d, J = 6.9 Hz, H-28）；1.03（3 H, d, J = 6.6 Hz, H-21）；0.94（3 H, s, H-19）；0.63（3 H, s, H-18）；¹³C-NMR（CD₃OD, 100 MHz）δ: 38.5（C-1），32.1 （C-2），70.6（C-3），40.6（C-4），141.5（C-5），119.7（C-6），116.4（C-7），139.9（C-8），46.4（C-9），37.2（C-10），21.3（C-11），40.9（C-12），43.0（C-13），54.7（C-14），23.2（C-15），28.4（C-16），55.9（C-17），12.2（C-18），16.4（C-19），39.2（C-20），21.3（C-21），135.7（C-22），132.1（C-23），43.0（C-24），33.2（C-25），20.1（C-26），19.8（C-27），17.8（C-28）。对比文献^[28]，化合物8的核磁数据与（22E,24R）-麦角甾-5 722-三烯-3β-醇 基本一致，所以化合物8确定为（22E,24R）-麦角甾-5,7,22-三烯-3β-醇。

化合物9：白色晶体，¹H-NMR（CDCl₃, 400 MHz）δ: 5.35（1 H, d, J = 5.2 Hz, H-6），3.53（1 H, m, H-3），1.00（3 H, s, CH₃-19），0.92（3 H, d, J = 6.5 Hz, CH₃-26），0.84（3 H, t, J = 7.5 Hz, CH₃-29），0.81（3 H, d, J = 6.5 Hz, CH₃-27），0.67（3 H, s, CH₃-18）；¹³C-NMR （CDCl₃, 100 MHz）δ: 37.4（C-1），31.8（C-2），72.0（C-3），42.4（C-4），140.7（C-5），121.9（C-6），32.1（C-7），32.0（C-8），50.3（C-9），36.7（C-10），21.2（C-11），39.9（C-12），42.5（C-13），56.9（C-14），24.5（C-15），28.4（C-16），56.2（C-17），12.1（C-18），19.2（C- 19），36.3（C-20），18.9（C-21），34.1（C-22），26.2（C-23），46.0（C-24），29.3（C-25），19.6（C-26），20.0（C-27），23.2（C-28），12.0（C-29）。对比文献^[29]，化合物9的核磁数据与β-sitosterol 基本一致，所以化合物9确定为β-sitosterol。化合物1‑9的结构式见图2。

2.2 活性测试结果

将菌株SWMU-WZ04-3分离得到的单体化合物1-9进行4种抗菌（包括金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、大肠杆菌和白色念珠菌）活性筛选，见表1，样品浓度为1 mg/mL，结果显示，化合物4具有较弱的抗大肠杆菌活性，其余化合物未见抑菌作用。

3 讨论

海洋真菌是产生先导药物的重要宝库，近年来，国内外学者对海洋真菌的研究兴趣日益浓厚，海洋真菌来源的天然产物的种类和数量逐年递增^[30-31]。曲霉菌属在自然界分布广泛，在海洋真菌中也属于优势菌种，对曲霉菌属真菌的研究更是层出不穷，从中发现的新天然产物已达到海洋真菌的31%^[32]，主要包括聚酮类（47%）、生物碱类（20%）、肽类（15%）和萜类（15%）等，多具有抗菌、抗肿瘤、抗氧化等良好生物活性^[1]。

广西涠洲岛是由火山喷发形成的，地貌和生态环境非常特殊。本研究创新性地选取了广西涠洲岛海绵中的一株海洋真菌Aspergillus sp. SWMU-WZ04-3作为研究对象，从它的次级代谢产物中成功分离得到了多种不同类型的化合物（如芳酮类、吡喃衍生物、甾体化合物和脂肪酸酯类等），这些化合物的多样性为后续的深入研究提供了丰富的物质基础。尤其是首次从该属种中分离得到化合物2, 5, 6，这进一步丰富了海洋真菌Aspergillus sp.次级代谢产物的多样性。此外，抗菌活性测试中，化合物4显示出较弱的抗大肠杆菌活性，化合物9在先前报道中具有抗炎活性、抗肿瘤活性、降低胆固醇等多种生物活性^[33-35]。未来有待从海洋真菌Aspergillus sp.次级代谢产物中探索更多结构新颖且活性良好的化合物，采用更多模型的生物活性测试，以期发现更多药物先导化合物。

4 结论

本研究通过对来源于广西涠洲岛海绵的一株海洋真菌Aspergillus sp. SWMU-WZ04-3的次生代谢产物进行研究，利用硅胶、ODS、PHPLC等现代色谱分析手段对该菌株的乙酸乙酯提取物进行分离纯化，再利用¹H NMR、¹³C NMR 等波谱技术对化合物单体结构进行鉴定，其中化合物2、5和6为首次从该属种中分离得到。本次分离的化合物类别为：化合物1、2和7为芳香酮类化合物，化合物3为吡喃衍生物，化合物4、8和9为甾体化合物，化合物5和6为脂肪酸酯类。对单体化合物进行抗菌活性测试，结果显示化合物4具有一定的抗大肠杆菌活性，其余化合物均未见明显抗菌活性。

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基金资助

四川省自然科学基金(2022NSFSC0109)

四川省大学生创新创业训练计划项目(S202210632194)