人胎膜体外孵育方法研究

摘要

目的探讨人胎膜体外孵育的方法,为进一步研究胎膜的结构和功能提供一种新的方法。方法取20例正常选择性剖宫产者的胎膜,在DMEM/F-12培养基中进行孵育,共孵育96 h,每24 h换液并测定胎膜的存活力,48 h后一部分胎膜分别给予细菌内毒素脂多糖(LPS)和LPS+N-乙酰半胱氨酸(NAC)刺激孵育中的胎膜24h。苏木精-伊红染色观察细胞形态,免疫组化方法检测各时间点胎膜中的基质金属酶-9(MMP-9)的表达情况,了解胎膜细胞的功能。结果20例胎膜的平均存活力24 h为87%±1.9%,48 h为85%±1.3%,72 h为83%±1.6%,96 h为37%±1.2%;前三者两两比较无统计学差异(P>0.05),前三者分别与96 h组比较均有统计学差异(P<0.05)。苏木精-伊红染色观察细胞形态变化,0～72 h细胞形态良好、饱满,72 h后细胞开始皱缩,至96 h大部分细胞死亡。免疫组化示0 h及48 h的胎膜MMP-9的表达微弱,24 h的MMP-9表达较前增强,LPS作用后MMP-9的表达明显增强,同时给予LPS+NAC的MMP-9表达又明显下降。结论DMEM/F-12培养基体外孵育胎膜是可行的,且方法简单。

关键词

胎膜 / 体外孵育 / 方法 / 脂多糖 / N-乙酰半胱氨酸