survivin反义RNA的克隆及慢病毒载体的构建

杨宇娟,裴冬生,徐开林,潘秀英,何徐彭,张成静

徐州医科大学学报 ›› 2005, Vol. 0 ›› Issue (06) : 35 -37.

杨宇娟,裴冬生,徐开林,潘秀英,何徐彭,张成静

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摘要

目的克隆小鼠survivin cDNA,构建survivin反义RNA的慢病毒载体。方法利用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法从肾癌786-0细胞中扩增出survivin cDNA,反向克隆到慢病毒载体转移质粒pLO134中。结果RT-PCR扩增出约370 bp片段,经酶切鉴定显示survivin反义RNA慢病毒载体(survivin pLO134)构建成功。结论sur-vivin反义RNA与已发表的的序列相同,我们已成功地把survivin反义RNA克隆到慢病毒载体转移质粒pLO134中。