携带IL24基因复制缺陷型腺病毒对膀胱癌生长的抑制作用

摘要

目的研究携带人IL24基因的复制缺陷型腺病毒(Ad-IL24)对膀胱癌的杀伤效应。方法聚合酶链反应(PCR)鉴定Ad-IL24,并扩增、纯化和滴度测定。Ad-IL24感染人膀胱癌Biu87细胞系,通过结晶紫染色及四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测细胞杀伤作用;Western blot法检测腺病毒IL24蛋白的表达情况;并进一步建立裸鼠膀胱癌模型,应用Ad-IL24瘤内注射体内观察抗肿瘤效果。结果PCR鉴定说明Ad-IL24包含目的基因且为复制缺陷型腺病毒;Western blot结果表明Ad-IL24能有效介导IL24基因在Biu87细胞中的表达;结晶紫染色结果表明Ad-IL24对Biu87细胞有明显的杀伤作用,MTT表明用MOI=10的Ad-IL24和Ad-EGFP感染Biu87细胞,6天后存活率分别为(47.6±2.6)%、(84.7±4.5)%,比较差异有统计学意义(P<0.05)。成功建立膀胱癌动物模型后,瘤内注射病毒Ad-IL24、Ad-EGFP和PBS后5周,AdIL-24、Ad-EGFP和PBS各组肿瘤大小分别为(420.3±49.0)mm3、(639.8±52.9)mm3和(766.1±75.8)mm3。结论成功获得纯化的Ad-IL24,并进一步证明Ad-IL24能在体内外有效抑制膀胱癌的生长,显示出良好的抗肿瘤效果,为进一步应用于膀胱癌基因治疗奠定基础。

关键词

腺病毒 / IL24 / 膀胱癌